论文部分内容阅读
目的 1、研究银屑病表皮p16INK4a基因启动子甲基化状态 2、分析银屑病表皮p16INK4a基因启动子甲基化与p16INK4amRNA表达量的关系 3、初步探讨银屑病表皮p16INK4a基因启动子甲基化与IFN-γ受体和TNF受体mRNA表达的相关性 4、探讨除启动子甲基化外，其它影响银屑病表皮p16INK4a基因表达的主要因素 方法 1、收集56例斑块型银屑病患者皮损处皮肤，其中28例患者同时采集距皮损边缘1cm左右外观正常皮肤。标本分为3组：皮损组、皮损周外观正常的未受累皮肤组（以下称未受累皮肤组）、以健康皮肤为对照组（以下称健康对照组）。分离表真皮，提取表皮DNA和RNA。 2、按银屑病面积和严重性指数（PASI）评分评估银屑病患者病情严重程度。 3、应用MSP方法检测表皮p16INK4a基因启动子甲基化状况，并分析其与临床资料的相关性。 4、应用RT-PCR方法检测表皮p16INK4amRNA表达水平，分析银屑病中p16INK4a启动子甲基化与其mRNA表达的关系。 5、应用RT-PCR方法检测表皮IFN-γ受体和TNF受体mRNA表达水平，分析p16INK4a启动子甲基化与两受体表达的相关性。 6、应用PCR-SSCP方法检测表皮CDKN2A基因位点外显子E1α、E1β和E2缺失和突变情况。 结果 一、斑块型银屑病患者皮损表皮p16INK4a基因启动子甲基化率增高，并与皮损严重程度和活动性有关，吸烟和有银屑病家族史的患者p16INK4a甲基化发生率增高。 1、28例患者皮损和未受累皮肤表皮p16INK4a基因启动子甲基化率分别为32.14％（9／28）和7.14％（2／28），健康对照组中未发现p16INK4a基因启动子甲基化（0／38），皮损高于未受累皮肤（P＜0.05），未受累皮肤与健康对照组比较无