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虫草素是虫草有效成分中的重要活性物质,具有抗癌、治疗白血病等作用功效,已经在全世界范围内引起了极大的关注。研究证实,蛹虫草作为产虫草素的主要菌株,其液态深层发酵液中虫草素的含量要比菌丝体及其子实体中的高。现在,通过液态深层发酵法生产虫草素已经成为一种趋势。而随着大孔吸附树脂在天然产物提取分离方面的应用越来越广泛,利用吸附树脂对发酵液中的虫草素进行提取纯化同样也值得研究。论文分离得到一株产虫草素的蛹虫草菌株JN168,对其发酵产虫草素的情况进行了初步研究,同时对高效液相色谱(HPLC)法检测发酵液中虫草素的含量进行了验证性实验,最后初步考察了大孔吸附树脂对发酵液中虫草素的提取分离情况。主要结果有:(1)通过对白化的蛹虫草菌株26S rRNA基因序列的聚类分析,鉴定出菌株JN168属于虫草属,命名为蛹虫草(Cordyceps militaris)JN168。(2)通过对发酵培养基及发酵条件进行单因素实验,确定菌株JN168液态发酵产虫草素培养基的组成为:蛋白胨10 g/L,蔗糖40 g/L,硫酸镁0.5 g/L;培养条件为:pH自然,温度25℃,摇床转速200 r/min,发酵周期为7 d。在以上条件下进行发酵,发酵液中虫草素产量一般可以达到90 mg/L。(3)确定HPLC法检测发酵液中虫草素含量的色谱条件为:江苏汉邦Media C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,检测波长260 nm,流速1.0 mL/min,进样量20μL,流动相水-甲醇(85:15)。(4)通过比较10种不同大孔吸附树脂对蛹虫草深层发酵液中虫草素的吸附性能,筛选出合适的大孔树脂H103,考察大孔树脂H103对发酵液中虫草素的吸附及解吸条件。实验结果表明,上样吸附前调节发酵液初始pH为9,上样浓度为0.2 g/L,吸附流速为2 BV/h时,大孔吸附树脂H103对蛹虫草深层发酵液中的虫草素有良好的吸附性能;解吸时先用去离子水洗去部分杂质,再用40%的乙醇对虫草素进行洗脱,可以得到较好的提取分离效果。