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本文对烟草感染PVYN后碳水化合物、激素、酶及非酶类化合物的改变进行了研究,首次对感病后烟草叶脉坏死机理进行了初步探讨,并测定了一些外源因子对烟草脉坏死病的影响,主要研究结果如下:
1.探讨了烟草苗龄、部位与发病的关系及韧皮部对PVYN运转的影响,研究表明,烟苗的苗龄、接种部位与发病严重程度有一定的相关性,就苗龄来说,苗龄小易发病;就部位而言,中部叶片接种发病严重。韧皮部光合产物能否顺利运输对PVYN运转有直接影响,用三氯乙酸阻断接种叶光合产物运输后,烟株发病比正常接种迟缓4d,病情轻。
2.对烟草感染PVYN后碳水化合物变化的研究表明,碳水化合物与烟草对PVYN的抗感性有一定相关性。接种PVYN后,抗病品种VAM还原糖含量升高,而感病品种K326还原糖含量下降;抗病品种VAM可溶性糖含量、淀粉酶活性呈下降趋势,而感病品种K326可溶性糖含量和淀粉酶活性呈升高趋势;抗病品种VAM和感病品种K326淀粉含量及蔗糖酶活性均有增加趋势,只是淀粉含量增加较明显,蔗糖酶活性的增加不明显。
3.烟草感染PVYN后内源乙烯和IAA变化的研究表明,乙烯生成速率和IAA含量的增加与烟草叶脉坏死症密切相关。抗病品种VAM随接种时间的延长,乙烯生成速率和IAA含量的变化比较平缓,而感病品种K326随接种时间的延长,乙烯生成速率和IAA含量的变化非常明显。吲哚乙酸氧化酶(IndoleaceticAcidOxidase,简称IAAO)活性的测定结果表明,在接种初期抗病品种VAM的IAAO活性有上升趋势,但活性值低于其健康对照;感病品种K326在接种PVYN后IAAO活性明显降低。
4.烟草感染PVYN后氨基酸含量、总酚及类黄酮等非酶类化合物变化的研究表明,总酚和类黄酮含量变化与烟草叶脉坏死的严重程度呈正相关性。感病品种K326感染PVYN后产生的脉坏死症状逐渐严重,接种处理与对照之间的酚类物质和类黄酮的含量差别也逐渐显著。不同部位总酚和类黄酮含量的研究表明,未感染PVYN时抗病品种VAM各个部位总酚和类黄酮含量比感病品种K326相应部位稍高些,但接种PVYN后感病品种表现明显叶脉坏死症状时,抗感性不同的烟草品种总酚和类黄酮含量增加幅度不同。感病品种K326接种处理后各部位总酚及类黄酮含量较对照处理均有所升高,尤其以叶脉的总酚和类黄酮含量增加最多。在接种PVYN后,抗病品种VAM和感病品种K326游离氨基酸总量有增加趋势。
5.烟草叶脉坏死相关成分初步研究的结果表明,在表现坏死的叶片与健康叶片间某种荧光物质存在明显的差异,推测该物质可能与坏死的表现相关。叶片浸提液加入碱后,荧光颜色由蓝色变为绿色;加入三氯化铁-铁氰化钾试剂后,生成墨绿色沉淀物质;病健组织浸提液的紫外吸收光谱在320~380nm存在差异,推测病健组织中存在差异的荧光物质可能是香豆素苷类物质。
6.酶活性测定结果表明,PPO活性与烟草叶脉坏死密切相关,PAL活性和POD活性与烟草抗PVYN相关。感病品种K326在接种PVYN后,PPO活性变化较明显,其活性值始终高于其对照处理,抗病品种VAM在接种PVYN后其PPO活性未发生明显变化,但抗病品种VAM无论接种处理还是对照的PPO活性值均高于感病品种K326的未接种对照处理。接种初期VAM的PAL活性和POD活性明显升高,而K326叶片中PAL活性和POD活性在接种后第6d时才开始呈上升趋势。
7.不同外源因子对烟草脉坏死病的防效试验表明,GA各个浓度的处理对PVYN都具有良好防治效果,其高浓度时比低浓度时防治效果显著,与克Y特灵混配后防治效果增强,可达88.89%;激动素各个处理无防治效果,但浓度为100mg/g时与克Y特灵混配后防治效果有所提高;EDTA各个处理的防效不理想,但当浓度为1mmol/L时与克Y特灵混配后防治效果达到了55.56%;Cu试剂浓度为5mmol/L时防治效果较好,达77.78%,但与克Y特灵混配后防效却有所下降。
不同外源因子处理后烟草总酚和类黄酮含量测定结果表明,病情指数高于接种对照的各药剂处理,如激动素的几个处理,其总酚和类黄酮含量也多高于接种对照,而低于健康对照;而病情指数明显低于接种对照的GA各处理,其总酚类黄酮含量也多低于接种对照,而与健康对照接近。
叶绿素测定结果显示,多数处理叶绿素含量低于接种及健康对照。GA各处理表现基本一致,除了10mg/LGA在接种第15d时叶绿素含量较接种对照高外,其他处理于接种之间的叶绿素含量均无明显差别,是供试药剂中表现最好的一组药剂。