松筋通络方对胶原性关节炎模型大鼠的实验研究

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目的:通过对胶原性关节炎大鼠模型关节肿胀度、关节炎评分等进行观察,并检测各组大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-1β、NF-κ B的表达水平,比较大鼠膝关节滑膜组织病理结果,观察松筋通络方对模型大鼠关节炎的治疗作用,探讨该方抑制关节炎症、保护关节的作用机理,为进一步开发、使用该方治疗RA提供实验依据。  方法:将40只5周龄Wi star雌性大鼠,随机分为空白对照组(A给)、模型组对照组(B组)、雷公藤多苷对照组(C组)和松筋通络方治疗组(D组),每组10只。建立Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,测量大鼠关节肿胀度,采用关节炎指数积分法评定关节炎指数,取关节滑膜及部分软骨进行病理检测,观察滑膜细胞和血管的增生,滑膜层及滑膜下层淋巴细胞浸润和软骨的增生及破坏等情况。采用ELISA法检测CIA大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-1β表达及松筋通络方的调控作用。用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κ B信号蛋白的活性。  结果:1、松筋通络方和雷公藤多苷对照组均对CIA大鼠滑膜重量、足趾肿胀度、关节炎指数均有不同程度下降,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。2、松筋通络方和雷公藤多苷对照组能够下调ClA大鼠血清致炎因子TNF-α、IL-1、IL-1β的表达;3、CIA模型对照组关节滑膜细胞NF-κ B蛋白活性高于空白对照组((P<0.01),松筋通络方和雷公藤多苷对照组均能够下调CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κ B蛋白的表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。4、松筋通络方对各项检测指标的改善与雷公藤多苷对照组比较,无显著性差异(P>0.05)。  结论:  (1)以牛Ⅱ型胶原蛋白、卡介苗及弗氏完全佐剂相混合后多点皮下注射Wistar大鼠可以成功复制ClA大鼠模型,在临床表现及病理变化等方面都具有RA的典型特点。  (2) CIA模型大鼠炎症期血清IL-1、IL-1β、TNF-α及NF-κ B等水平均明显升高,说明它们的致炎作用参与了关节炎症及关节破坏的过程。  (3)松筋通络方能下调IL-1、IL-1β、TNF-α的表达,并可以抑制NF-κ B的活化,有效控制炎症发展。  (4)松筋通络方经病理检查能有效减轻滑膜组织的肿胀、增生,抑制淋巴细胞的浸润,说明松筋通络方可以抑制滑膜炎症,对关节具有保护作用。
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