目的：筛选建立具有不同转移潜能高侵袭能力食管癌细胞株的亚系并研究其生物特性。方法：利用Transwell侵袭小室从人食管鳞癌Eca-109细胞株中筛选出高侵袭能力食管癌细胞株亚系，通过HE染色比较两系的细胞形态；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖能力的变化；流式细胞术（FCM）检测两系的细胞周期；蛋白质印迹法检测与侵袭能力相关基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶抑制因子-2（TIMP-2）蛋白表达。结果：用Transwell侵袭小室成功从食管癌细胞株Eca-109中筛选出高侵袭能力食管癌细胞株亚系，命名为Eca-109T4。两系在细胞形态上没有明显差异；MTT法检测显示亚系Eca-109T4增殖能力强；细胞周期显示亚系增殖指数（Proliferation Index，PI）高，PI=41%；且MMP-2蛋白表达相比增高（P=0.023,P＜0.05），差异有统计学意义；TIMP-2蛋白表达相比增高,差异无统计学意义（P=0.392, P＞0.05）。结论：筛选出具有不同转移潜能高侵袭能力食管癌细胞株亚系，为探讨食管癌转移机制的研究奠定了实验基础。