靶向siRNA沉默WNT3基因表达对胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响

来源 :内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xinfan413
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  研究通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默胃癌MGC-803细胞的WNT3基因,检测WNT3基因对胃癌MGC-803细胞及其生物学行为的影响。  方法:  实验设计合成了4组WNT3 siRNA干扰质粒(L337、L714、L981、L1188),通过脂质体将干扰质粒转染到胃癌MGC-803细胞,沉默WNT3基因,在转染24h和48h后,分别利用实时定量PCR(Real-time quantitative PCR)和蛋白印迹(Western blotting)检测WNT3mRNA及蛋白的表达情况;采用Cell Counting Kit(CCK-8)法检测转染后0h、24、48h和72h胃癌MGC-803细胞增殖活性的变化;采用粘附实验检测转染后48h人胃癌MGC-803细胞的粘附率变化情况。用Transwell及划痕实验分析转染后48h人胃癌MGC-803细胞侵袭、迁移的影响;流式细胞仪检测转染后48h胃癌MGC-803细胞周期和细胞凋亡变化情况。  结果:  siRNA干扰质粒成功转染人胃癌MGC-803细胞中,转染效率达80%,在转染24h和48h后,分别进行实时定量RT-PCR检测WNT3 mRNA的表达水平和Western blotting检测蛋白表达水平。  结果显示:  1、siRNA干扰质粒转染胃癌MGC-803细胞24h和48h后,W714与W1188干扰组MGC-803细胞中WNT3 mRNA和蛋白质表达水平降低,与对照组比,差异有统计学意义。  2、选取L714与L1188干扰组进行后续的实验。CCK-8结果显示,干扰组细胞的增殖明显受到抑制;粘附实验结果显示,干扰组细胞的粘附水平显著升高;Transwell及划痕结果显示,干扰组细胞的侵袭水平和迁移能力降低;流式细胞仪结果显示胃癌MGC-803细胞的凋亡水平显著升高,而且干扰组细胞的细胞周期,S期比例升高,G1期比例降低,发生了S期阻滞现象。  结论:  本研究结果显示沉默WNT3基因后人胃癌MGC-803细胞的多种生物学行为均有改变:WNT3 siRNA干扰胃癌MGC-803细胞基因沉默效果显著,降低了胃癌MGC-803细胞的增殖速率,提高了胃癌MGC-803细胞的粘附率能力,促进了胃癌MGC-803细胞的凋亡,影响了胃癌MGC-803细胞的细胞周期,S 期比例升高,G1期比例降低,减弱了胃癌MGC-803细胞的侵袭和迁移力WNT3基因沉默。研究结果显示,WNT3基因可能成为一个新的抗肿瘤作用靶点。  创新点:  本课题首次探讨胃癌细胞MGC-803 WNT3基因沉默后,对肿瘤细胞粘附率、增殖力、侵袭力、迁移力、细胞凋亡及周期等生物学行为的影响。
其他文献
7月15日,重庆浪尖渝力科技有限公司科协成立大会在公司召开。重庆沙坪坝区科协党组书记、主席徐晓川,副主席王玲玲,公司副总经理徐清明出席会议。重庆浪尖渝力科技有限公司是重
目的观察小茴香治疗四氯化碳(CCL4)和乙醇诱导的实验性肝纤维化大鼠后,对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达水平的影响,初步探讨其作用机制。方法用40 %CCl4石蜡油(0.2ml 100g-1/只)腹腔注射(每周两次),10%乙醇为唯一饮料制造肝纤维化模型。70只wistar健康大鼠随机分正常对照组(A)、模型组(B)、秋水仙碱治
在我国互联网的全面普及下,煤炭运输铁路沿线各网络节点相互连接,共同构成了一个覆盖面较广的煤炭运输铁路网.该铁路网络与电子支付、监控系统等进行相互连接,为顺利实现煤炭
随着国内汽车检测机构业务量的激增与业务范围的扩大,检测业务自动化程度低的痛点逐渐显现,数据分析和报告出具耗费大量的人力成本,本文结合工作中的实际检测业务,通过信息化
随着当代科学技术发展进步,移动互联网技术得到普及,并且为实现企业高效化管理提供了便捷的途径.现代企业,人力资源管理是企业重要的日常行政工作,它肩负着招募企业员工、培
数据通信网络随我国社会经济的不断进步而应用得越来越广泛,且正朝着智能化、综合化及数字化方向发展.目前数据通信已成为人们日常交流与沟通的主要方式,是通信领域的重要组
气象观测装备保障工作对于确保气象观测业务的顺利开展具有重要意义.本文主要根据内蒙古自治区气象观测装备保障工作现状,对该项工作中出现的问题进行分析,并提出了一些气象
COSMIC-FFP方法是软件规模度量领域应用较多的度量方法之一,但该方法基于数据跨层移动识别功能点的方式并不适用于算法类功能.为了真实地度量算法类功能,本文基于COSMIC-FFP
目前社会已步入“互联网+”时代,各个领域都离不开大数据、互联网,但是“互联网+”这一时代毕竟是机遇与挑战并存的,当大众在享受互联网所带来的便捷生活的同时,还要面临网络
目的研究鼻咽癌患者放射治疗后的颈髓损伤状况。方法选择2013年1月至2014年10月间青岛市肿瘤医院收治的鼻咽癌放疗后出现放射性颈髓损伤(RICCI)的30例患者为研究组,以同期门