为深入研究瘦素(leptin)在酒精性脂肪肝中的表达,探索其在这种疾病中的发病作用,本研究通过生理方式喂食酒精建立大鼠酒精性脂肪肝模型,并采用分光光度法、ELISA法测定相关酶的活性及利用RT-PCR和免疫组化法检测leptin mRNA和蛋白在模型中的表达。结果表明:1.通过生理方式喂食酒精建立大鼠酒精性脂肪肝模型,由病理分析可知:酒精组大鼠肝小叶内均出现大量的脂肪变性以及细胞水肿症状(中度以上),且在汇管区域伴有少量炎细胞浸润和部分点状坏死;酒精组肝系数高于对照组和正常组,说明酒精性脂肪肝模型已建立。2.应用分光光度法测定血浆中与肝细胞损伤相关酶(AST、ALT)的活性及ELISA法测定血浆中TNF-а和leptin含量,结果表明:酒精组血浆ALT、AST均高于对照组和正常组;同时酒精组TNF-а和leptin含量也高于对照组和正常组。3.应用分光光度法测定10%的肝匀浆中的谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量,结果表明:酒精组肝匀浆中GSH和SOD活性逐渐下降,MDA含量却逐渐升高。4.采用免疫组化法测定酒精组肝组织leptin蛋白分布及表达。免疫组化染色显示:酒精组的枯否氏细胞(KC)呈阳性,主要以核内表达为主,此外少量肝细胞以及汇管区内肝纤维化细胞也呈阳性。5.通过RT-PCR法检测leptin mRNA在肝组织中的表达,结果显示:酒精组leptin mRNA表达增强,且leptin /B-actin比值也高于对照组和正常组。本研究通过生理方式喂食酒精成功建立大鼠酒精性脂肪肝模型,采用分光光度法、ELASE法、免疫组化法和RT-PCR法等方法测定与肝细胞损伤相关的酶、生化物质、TNF-а因子活性以及瘦素含量、瘦素mRNA和蛋白质的分布及表达,进行多层次的综合分析研究。这些研究结果为深入研究酒精性脂肪肝的发病机制提供了科学的、有用的理论研究依据,具有较为重要的理论研究意义和医疗实践价值,也将在药物治疗方面提供一个新的思路。