云南烟草病毒检测及防治研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangshuxi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
烟草病毒病是危害烟叶生产最重要的病害之一,危害烟草的病毒种类多达30多种,花叶型病毒病田间常见,曲叶型病毒病的危害呈上升趋势。为了弄清云南烟草病毒病的种类,对云南省烟草花叶型和曲叶型病毒病样品进行了血清学和分子检测,并对烟草病毒病控制进行了研究。采用抗原直接包被法和双抗体夹心法对采自云南烟草花叶病样本进行了病毒种类检测,并利用三抗体夹心法对黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的亚组类型进行了鉴定。在云南采集的520个病毒病样本中,烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、CMV和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)总检出率分别为71.74%、55.01%和6.35%,云南、湖南和福建64个CMV阳性样品中,属亚组Ⅰ的样品为57个,占89.1%,属亚组Ⅱ样品为10个,占15.6%。采用烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,TbCSV)、云南烟草曲叶病毒(Tobacco leaf curl Yunnan virus,TbLCYNV)、中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)的特异引物,对云南烟草曲叶病样本的病原进行了PCR检测;采用粉虱传双生病毒PA和PB通用引物,对代表性样品进行了扩增、克隆测序和序列比对。检测表明云南烟草曲叶病是由TbCSV、TbLCYNV和TYLCCNV三种病毒引起的。109个烟草曲叶症状的样本中,TbCSV总检出率为41.3%、TbLCYNV总检出率为16.5%、TYLCCNV总检出率为53.2%。其中两种或三种病毒复合侵染的检出率为8.2%。500 bp序列比较表明,这些病毒分离物之间的相似性为77%~100%。依据500 bp序列构建的同源关系树上,所有TYLCCNV的分离物因地理隔离聚为两大类,一类为保山分离物,相互间核苷酸序列相似性为93%,另一类为文山和红河分离物,相互间核苷酸序列相似性为95%,两类之间核苷酸序列相似性为89%。对其中一个分离物Y264 DNA-A的全序列测定表明,Y264 DNA-A全长2741个核苷酸(nts)。具有典型的begomoviruses结构,共编码6个开放读码框(ORFs)。DNA-A全长与中国番茄黄化曲叶病毒分离物Y10的相似性最高,为91.3%,各ORFs编码的氨基酸序列与TYLCCNV的相似性最高。因此,Y264为TYLCCNV的一个分离物。采用三抗体夹心法对云南烟草漂浮苗样本进行了病毒种类检测,在云南采集的1400多个烟草漂浮苗样本中,TMV的检出率占总阳性样本数的95%以上;CMV和马铃薯Y属病毒(包括PVY和TEV)的检出率占总阳性样本数的5%以下。在漂浮苗移栽后至团棵期,在发病率高(20%以上)的田块中采集的480个花叶病样本中,不同田块TMV检出率48.1%~100%,而CMV和马铃薯Y属病毒(包括PVY和TEV)检出率0%~12.2%。表明危害云南烟草漂浮苗的主要病毒种类为TMV。采用半叶法测定了9种药剂对烟草病叶汁液中TMV的钝化效果,采用叶面喷雾法测定了药剂对烟草的药害浓度与药害症状。室温下一定浓度的药剂与1:10000的TMV病叶汁液等体积混合3 min时,30%有效氯漂白粉10倍液、98%磷酸三钠·12H2O 10倍液、7%有效氯次氯酸钠150倍液、美国消毒剂125倍液和75%酒精TMV的抑制率可达100%;10%二氧化氯200倍液和40%育宝150倍液与TMV混合30 min时对TMV的抑制率可达100%和96.30%;0.6%菌毒净125倍液、3.95%病毒必克800液和24%毒消800倍液与TMV混合30 min时对TMV的抑制率低于80%。除0.6%菌毒净较安全外,供试消毒剂在常用浓度下接触烟草叶片,产生较严重药害,症状因消毒剂种类不同,主要为褪绿斑点、坏死斑点和畸形。试验了在漂浮育苗池中使用消毒剂对TMV的钝化效果和烟苗出苗和生长的影响。枯斑寄主测定表明:与TMV病叶汁液2万倍稀释液接触12 hr,对TMV的抑制率高于80%的消毒剂及浓度为:30%有效氯漂白粉15 mg/L和150 mg/L;7%有效氯次氯酸钠2μl/L和20μl/L;美国消毒剂5μl/L和50μl/L。漂浮池水中加入低浓度消毒剂,出苗率和成苗率与对照差异不显著,但对烟苗后期长势的影响因消毒剂种类而有差异。对烟苗长势有促进作用的消毒剂有:磷酸三钠15mg/L~300mg/L、硫酸铜50mg/L~100mg/L、高锰酸钾10mg/L~40mg/L和24%毒消10μl/L。对烟苗长势低浓度无明显影响而高浓度有抑制作用的消毒剂有:40%育宝、30%有效氯漂白粉、7%次氯酸钠、美国消毒剂和0.6%菌毒净。为避免消毒剂对烟苗生长的影响,池水中消毒剂使用终浓度不能超过下列浓度:40%育宝100μl/L、30%有效氯漂白粉300mg/L、7%次氯酸钠20μl/L、美国消毒剂50μl/L、0.6%菌毒净100μl/L。
其他文献
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
目的探讨复合维生素应用于孕中晚期对于胎儿生长发育情况的影响。方法以我院门诊194例孕周为12~40周的单胎妊娠妇女为调查对象,按照自愿用药情况分为观察组(114例)和对照组(8
高速公路是一把双刃剑,有力地促进了经济社会的发展同时,提高了人们的生活质量,高速公路具有交通量大、速度高等特点,自1988年我国的第一条高速公路建成通车,交通事故发生数
针对我国农药使用技术广泛采用大雾滴、大容量喷雾方法的现状,本文基于充分利用农药喷洒过程中小雾滴的有效性和如何控制其飘移性,以实现降低农药用量的喷雾技术,分析探讨了
翻译要保障文化内涵得以传递,要减少文化冲突,还要要考虑到目标语受众的理解和接受,翻译视角下少数民族文化话语体系构建时必须要强调民族思想文化的内在支撑,需要以合理的方
大自然在亿万年的漫长演变历程中,逐渐形成了五彩缤纷、大小各异的生命,它们各自占据着属于自己的领域,并在激烈的生存斗争中完成自己的生活史,代代相传延续着本家族的“香火
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
关于现代企业制度试点工作操作实施阶段的指导意见鉴于目前国务院确定的百家现代企业制度试点企业的试点实施方案已经得到批复,部分试点企业陆续挂牌,试点工作已进入操作实施阶
大学的管理系统与社会上的企事业单位相比有着显著不同的特点,以企事业单位的管理性质和特点来要求大学的管理显然是错误的.大学是实施高等教育的社会组织.大学本质上是一个
耐温耐剪切性能是压裂液性能的重要参数,也是决定压裂施工成败的关键因素之一。为拓宽黄原胶非交联压裂液的应用范围,提高其压裂施工效果,针对黄原胶(XG)溶液的耐温耐剪切性