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目的:观察GCNF及其相关因子Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中的表达,同时观察2种基因在P19细胞体外诱导分化前后的表达,为进一步研究恶性生殖细胞肿瘤的发病机制,诊断及治疗提供新思路。方法:1.收集我校一附院病理科30余年来(1975.1-2007.12)存档的所有恶性生殖细胞肿瘤蜡块,3μm厚连续切片;运用RT-PCR技术,免疫组织化学,免疫组织化学半定量,间接免疫荧光双标记等技术检测GCNF和Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤。2.体外培养P19细胞,用全反式维甲酸诱导肿瘤细胞分化,在不同时间段用上述方法检测GCNF和Oct-4的表达。结果:首次观察到GCNF在所有的恶性生殖细胞肿瘤及无瘤变的睾丸组织中均有表达;Oct4表达于大部分未成熟畸胎瘤(8/10),全部的无性细胞瘤及精原细胞瘤,而在其他恶性生殖细胞肿瘤及无瘤变的睾丸及卵巢组织未见表达。GCNF和Oct-4均定位于肿瘤细胞的胞核。免疫组织化学半定量结果显示,GCNF与Oct-4在不同类型肿瘤组织中的表达量的差异有统计学意义,二者表达呈负相关。对于不同类型的恶性生殖细胞肿瘤来说,向原始生殖细胞方向分化越远,Oct-4表达程度越低,甚至不表达,而GCNF表达程度就越强烈。间接免疫荧光双标记显示,在同一肿瘤细胞中GCNF和Oct-4蛋白不同时强阳性表达;用ATRA诱导P19细胞3天时,GCNF的表达量增加,同时Oct-4的表达下调,GCNF和Oct-4的表达呈负相关。结论:(1)GCNF在恶性生殖细胞肿瘤中的定位提示GCNF可能与肿瘤的恶性程度相关;(2)GCNF在恶性生殖细胞肿瘤及体外诱导分化中表达量的变化,提示GCNF和Oct-4的表达程度可能与肿瘤的分化程度或分化方向有关;(3)GCNF和Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中呈负相关,提示GCNF在恶性生殖细胞肿瘤中的作用可能是通过抑制Oct-4基因的表达而实现的;(4)GCNF和Oct-4在P19细胞诱导分化前后表达量的变化,提示GCNF可能通过下调Oct4基因的表达参与恶性生殖细胞肿瘤的分化。