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奶牛隐性乳房炎是危害奶牛养殖业最常见的疾病之一,隐性乳房炎不仅影响奶牛产奶量和乳品质,而且造成奶牛业严重的经济损失。本试验通过对扬州地区奶牛场泌乳牛群隐性乳房炎的调查,分析其发生规律,并对主要致病菌进行分离培养和鉴定。通过PCR-SSCP、PCR-RFLP和测序相结合的方法,研究LAO基因和IL-8基因5侧翼区多态性,并采用最小二乘法对其多态性与奶牛泌乳性状及体细胞评分(SCS)的相关关系进行初步研究。本研究包括以下试验:
试验一:从2009年到2010年共8个月份对扬州地区某牧场的泌乳奶牛进行BMT检测,研究发病率与胎次、季节、泌乳月等因素之间的关系。试验结果表明:
1、共检测2162头次奶牛8034个乳区,头数发病率为30.02％,乳区发病率为14.48％。
2、隐性乳房炎的发病率随着胎次的增加而上升,差异极显著(P＜0.01)。
3、奶牛隐性乳房炎的发病率随季节的变化而变化,差异极显著(P＜0.1),其中以9月份最高(46.23％)。
4、在泌乳期,随着泌乳月份的增加,隐性乳房炎的发病率总体上呈上升趋势,差异极显著(P＜0.01)。
试验二:试验对象是4个奶牛场310头无临床症状的荷斯坦奶牛,采用微生物学方法对隐性乳房炎的主要致病菌进行分离培养和鉴定。试验结果表明:
1、其中139头患有隐性乳房炎,发病率44.84％,在1163个乳区中,患病乳区有208个,乳区患病率为17.88％。
2、在208份奶样中共分离到葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌3种主要病原菌322株,其中葡萄球菌71株,占分离菌株的22.05％;大肠杆菌95株,占分离株数的29.50％;链球菌156株,占分离菌株的48.45％。
3、牛只的混合感染情况表明,病原菌单独感染率为43.16％,其中链球菌的单独感染率达31.65％;病原菌混合感染率占54.68％,多为大肠杆菌和链球菌混合感染。
试验三:LAO基因和IL-8基因5侧翼区基因多态性及其与泌乳性状和SCS的关联性分析结果表明:
1、在LAO基因3侧翼区+84(A/G)位点处发生突变,有3种基因型,分别命名为AA、AB和BB型。AB基因型日产奶量极显著高于AA基因型(P＜0.01),AB基因型、AA基因型日产奶量与BB基因型之间均无显著性差异(P＞0.05)。同时,该位点不同基因型与SCS的相关性不显著(P＞0.05)。
2、在IL-8基因5侧翼区-233(G/A)位点处发生突变,有3种基因型,分别命名为CC、CD和DD型。CD基因型日产奶量极显著高于CC基因型(P＜0.01),DD基因型日产奶量显著高于CC基因型(P＜0.05),CD基因型日产奶量与DD基因型无显著性差异(P＞0.05);CD基因型乳糖含量极显著高于DD基因型(P＜0.01),CC基因型乳糖含量显著高于DD型(P＜0.05),CD基因型乳糖含量与CC基因型差异不显著(P＞0.05)。同时,该位点不同基因型与SCS的相关性不显著(P＞0.05)。