甜菊糖苷的提取纯化工艺研究

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甜菊糖苷(steviol glycosides)是一类从菊科植物甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)的叶子中提取得到的高甜度、低热量的天然非营养型甜味剂。甜菊糖苷在体内具有多种药理活性且无毒副作用,已作为天然蔗糖的替代品,引起了广大学者的注意。目前,甜菊糖苷广泛应用于化妆品、食品和医药等工业中。本论文以甜菊糖苷为研究对象,以甜菊糖苷的提取率、甜菊糖苷的损失率和甜菊糖苷的纯度为评价指标,围绕甜菊糖苷的提取、除杂、纯化、精制和脱色工艺条件的优化为研究目标开展了以下几个方面的工作:1.甜菊糖苷的提取工艺研究以甜菊糖苷提取率为评价指标,分别考察回流提取法,浸提法,逆流提取法,酶法和回流套提法5种方法提取甜叶菊叶中甜菊糖苷的提取工艺。结果表明:回流法、浸提法、酶法、逆流法和回流套提法在最佳提取条件下的提取率分别为98.08、80.17、86.98、79.98和94.54 %。相比较回流套提法的提取率高、时间短、用水量少。因此,回流套提法用于提取甜菊糖苷具有独特的优越性。2.甜菊糖苷的除杂工艺研究以甜菊糖苷的损失率和除杂率为评价指标,考察了几种除杂方法对甜叶菊水提取液的除杂效果,实验结果表明,醇沉法对甜叶菊水提取液具有较好的的除杂效果,醇沉的除醇沉最佳条件为:以10 mL/min的速度向水提液中加入95 %的乙醇至体系乙醇浓度达到80 %,静置1 h,离心分离。在此条件下,其最佳工艺除杂率为16.47 %,甜苷损失率为6.13 %。3.甜菊糖苷纯化精制工艺的研究(1)通过动态吸附试验,系统的研究了L型大孔吸附树脂对甜菊糖苷的最佳吸附/解吸工艺条件为:使用串联双柱,上样体积为4200mL;上样浓度0.025g/ml;吸附速率为40 BV/h;水洗脱量为800 mL(10BV),洗脱速率为7.2 BV/h;吸附和洗脱温度为40℃;洗脱液为混合溶液;洗脱速率为20 BV/h。(2)选择4种大孔吸附树脂,通过比较其对甜菊糖苷的静态吸附结果,筛选出较适合精制甜菊糖苷的大孔吸附树脂,且对甜菊糖苷进行了动态吸附,其工艺条件为:上浓度为0.1 g/mL;吸附速率为12 BV/h;上样体积40 mL;洗脱剂为70 %乙醇,收集100 mL。4.甜菊糖苷的脱色工艺研究采用活性氧化铝-中压柱对甜菊糖苷进行吸附脱色,发现活性氧化铝对甜菊糖苷有一定的脱色作用,对甜菊糖苷的纯度与质量也产生一定的影响。其优化条件为:以水为溶剂;吸附温度为35℃,吸附时间为30 min;甜菊糖苷与氧化铝的质量比为1: 0.8;脱色后的甜菊糖苷用连续中压柱层析法对甜菊糖苷进行纯化制备,用蒸馏水洗脱,得到的甜菊糖苷的纯度为91.76%。
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