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梧桐花，又名龙船花。我国南北各省，从广东海南岛到华北均产之，也分布于日本，多为人工栽培。好生于温暖湿润的环境，耐严寒、耐干旱及瘠薄。夏季树皮不耐烈日，在砂质土壤上生长较好。据《纲目拾遗》记载其药性味苦、微辛、性平，归经为肺肝、大肠经，具有祛风、降压、止痢之功效，主治风气头痛、高血压病、痢疾疝气，具有较高的药用价值。梧桐花含黄酮类物质等多种生物活性成分，其主要成分具有抗菌、抗病毒、抗氧化、提高人体免疫机能等功能。目前对于梧桐花应用的研究主要集中在其芹菜素的提取及其应用，而在畜牧业方面的应用少有报导。梧桐花作为药用植物，来源广泛、价格低廉、功能多样，其多种生物学成分与抗生素相比具有潜在的应用价值，值得深入研究。鉴于前人相关的研究，本研究针对导致畜禽疫病的几种重要细菌和病毒，研究梧桐花总黄酮物的抑菌、抗病毒效果，为开发纯天然绿色、无毒无害的生物制品提供试验依据；同时选择梧桐花多糖对小鼠免疫新城疫疫苗、支气管败血波氏杆菌灭活苗的免疫增强作用为研究的切入点，研究梧桐花多糖的免疫增强作用，为开发新型免疫增强剂及疫苗佐剂提供试验依据。本研究共分为以下四个部分：第一部分梧桐花总黄酮的提取及其抑菌抗病毒作用的研究采用有机溶剂法对梧桐花总黄酮进行了提取，以乙醇为有机溶剂，采用回流法提取了梧桐花总黄酮。采用培养基打孔法，观察梧桐花总黄酮对致病菌的抑菌作用；采用试管法检测梧桐花总黄酮对各个细菌的最小抑菌浓度（MIC）。运用细胞培养，检测不同浓度梧桐花总黄酮对传染性囊病病毒(IBDV)和新城疫病毒(NDV)在CEF上增殖的抑制作用以及梧桐花总黄酮在体外作用后对传染性囊病病毒(IBDV)和新城疫病毒(NDV)的灭活作用。结果表明：梧桐花总黄酮对供试菌均具有抑菌作用，其中对四联球菌、八叠球菌、大肠杆菌、禽波氏杆菌有明显的抑菌圈，抑菌直径D＞16mm；各个供试菌对梧桐花总黄酮的MIC进行检测，其中MIC最小的是四联球菌（1.563mg/ml），最大的是产气杆菌（12.5mg/ml）；梧桐花总黄酮对IBDV和NDV在CEF细胞的增殖有抑制作用，当浓度为3.125mg/ml时能够100%抑制NDV在CEF中增殖，浓度为1.563mg/ml时能够100%抑制IBDV在CEF中增殖；梧桐花总黄酮在浓度分别为0.781mg/ml和1.563mg/ml时，在体外与IBDV和NDV作用2h后，能完全灭活以上两种病毒。第二部分梧桐花多糖提取及其条件的优化采用正交试验的方法，从料液比、提取温度、提取时间、提取pH值4个方面对梧桐花多糖提取条件进行了研究。结果表明不同料液比、提取温度、提取时间、提取pH值对梧桐花多糖的提取量有着不同的影响，综合考虑各个提取指标最终确定梧桐花多糖最佳提取工艺参数，料液比为1:25，提取温度为70℃，提取时间为4h，pH为6.6，最终粗多糖得率为12.1%，其中多糖含量为82.3%。第三部分梧桐花多糖对新城疫疫苗的免疫增强作用用优化的水提醇沉法提取梧桐花多糖，制备梧桐花多糖新城疫疫苗。取清洁级昆明小鼠（雄性）120只（体重18-22g），4-5周龄，随机分为8组，每组15只。试验分组：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为梧桐花多糖-新城疫疫苗组；Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组为CTX-梧桐花多糖-新城疫疫苗组；Ⅶ组为CTX-新城疫疫苗对照组；Ⅷ组为生理盐水-新城疫疫苗对照组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅷ组第1d皮下注射灭菌水隔1d注射1次，总计注射5次；Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组在第1d皮下注射75mg·kg-1CTX，隔1d注射1次，总计注射5次。第12d，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ小白鼠皮下注射免疫梧桐花多糖新城疫疫苗；Ⅶ、Ⅷ小白鼠皮下注射新城疫疫苗；注射剂量均为0.3ml。检测前12h内小鼠禁食不禁水，分别在疫苗免疫后第3d、10d、15d对小鼠进行尾静脉采血，进行相关指标的检测。结果表明Ⅰ、Ⅱ组血清抗体水平、血液淋巴细胞比率、淋巴细胞数、淋巴细胞转化率明显高于Ⅷ组（P＜0.05），Ⅳ、Ⅴ组血清抗体水平、血液淋巴细胞比率、淋巴细胞数、淋巴细胞转化率与Ⅶ组比较差异显著（P＜0.05），Ⅳ组与Ⅷ组在免疫后各个时期差异不显著。第四部分梧桐花多糖对支气管败血波氏杆菌灭活苗的免疫增强作用将清洁级昆明小鼠（雌性）120只（体重20-24g）随机分为8组，每组20只。试验分组：A、B、C组为梧桐花多糖-支气管败血波氏杆菌灭活苗组；D、E、F组为CTX-支气管败血波氏杆菌灭活苗组，G组为CTX-支气管败血波氏杆菌灭活苗对照组；H组为支气管败血波氏杆菌灭活苗对照组。A、B、C、H组第1d皮下注射灭菌水隔1d注射1次，总计注射5次；D、E、F、G组于第1d一次腹腔注射75mg·kg-1CTX，隔1d注射1次，总计注射5次。第12d，A、B、C、D、E、F小白鼠皮下注射免疫支气管败血波氏杆菌梧桐花多糖灭活苗；G、H组小白鼠皮下免疫支气管败血波氏杆菌梧桐花多糖灭活苗；剂量均为0.3ml。检测前12h内小鼠禁食不禁水，分别在疫苗免疫后第3、10和15d对小鼠进行心脏采血，颈椎脱臼处死后取脾脏和小肠进行相关指标的检测。结果表明A、B组血清抗体水平、血液淋巴细胞比率、淋巴细胞数、淋巴细胞转化率明显高于H组（P＜0.05）；D、E组血清抗体水平、血液淋巴细胞比率、淋巴细胞数、淋巴细胞转化率显著高于G组（P＜0.05），E组与H组在免疫后各个时期差异均不显著。