一、目的：　　研究复方芍药甘草汤及其组分芍药、甘草对P-糖蛋白(P-gp)功能和表达的影响，为芍药甘草汤在临床上与其他药物联合应用提供参考。　　二、方法：　　采用常规MTT法检测不同受试药物的细胞毒性，以选择进行以下试验的剂量。(1)芍药甘草汤及其组分对罗丹明-123透过Caco-2细胞膜的影响:分别采用流式细胞术和荧光显微镜法观察芍药甘草汤及其组分对P-gp底物罗丹明-123(Rh-123)透过Caco-2细胞膜吸收进入细胞内的影响，从而评估药物对P-gp功能的影响。(2)芍药甘草汤及其组分对Caco-2细胞中P-gp表达的影响:芍药甘草汤及其组分与Caco-2细胞孵育24h后，应用细胞免疫组化法分析Caco-2细胞中的P-gp表达。　　三、结果：　　1.细胞毒实验　　根据MTT结果筛选受试药物的无毒剂量范围如下:芍药提取物(1.5～1500μg/mL)，甘草提取物(2.85～2850μg/mL)，芍药甘草汤(5.5～5500μg/mL)，芍药苷(0.1～1000μg/mL)，甘草酸盐(0.085～85μg/mL)，阳性对照药维拉帕米(20μ M，100μM)。　　2.受试药物对Rh-123在Caco-2细胞中转运的影响　　用流式细胞仪测定细胞内Rh-123的荧光强度，复方芍药甘草汤在5.5～55μg/mL浓度范围内使Rh-123转运入细胞内的量升高了31.832％，32.185％。说明该方对P-gp功能有一定的抑制作用。芍药提取物在1.5～150μg/mL剂量内使细胞内Rh-123量升高了28.759％、36.715％、20.181％。甘草提取物对细胞内Rh-123影响不明显。单体成分芍药苷和甘草酸盐在所试浓度范围内对各组细胞内的Rh-123未见明显增加。　　用荧光显微镜直观观察，芍药甘草汤在5.5μg/mL时细胞内的荧光强度较对照组显著增加了27.225％(P＜0.05)，与流式细胞术测定结果相似。芍药提取物(1.5，15，150，1500μg/mL)组Caco-2细胞内的荧光强度分别增高了9.443％、16.941％、30.072％、21.383％。甘草提取物(2.85，28.5μg/mL)对Caco-2细胞内Rh-123有轻度提升作用(24.668％、16.951％)。芍药苷(0.1～1000μg/mL)浓度范围内可促进细胞对Rh-123的吸收，但其作用不强。甘草酸在高浓度(8.5，85μg/mL)可增加细胞内Rh-123浓度，提示对P-gp有一定抑制作用。　　3.受试药物对Caco-2细胞膜上P-gp表达的影响　　不同浓度的药物与Caco-2细胞作用24h后，芍药甘草汤(5.5，55，550μg/mL)对P-gp表达有一定抑制作用，抑制率分别为27.7％、26.3％、30.3％。芍药提取物对P-gp表达也有抑制作用，1.5、15μg/mL剂量组作用最强，抑制率分别为38.3％、47.9％;甘草提取物2.85，28.5，285μg/mL组对P-gp表达的抑制率分别为36.0％、44.2％、36.9％。芍药苷在0.1～1000μg/mL浓度范围对P-gp的抑制率为37.1～48.6％，甘草酸盐在0.085～85μg/mL浓度范围对P-gp表达的抑制率为23.3％～41.7％。　　四.结论：　　复方芍药甘草汤在一定的浓度范围内对Caco-2细胞中P-gp的表达量以及P-gp功能均有抑制作用，从而可提高P-gp底物的转运吸收。芍药对P-gp的表达量以及P-gp的功能均有抑制作用，甘草对P-gp的表达有抑制作用，但对其功能的影响较弱。推测芍药甘草汤抑制P-gp功能与表达的作用与芍药和甘草均有一定关系，但二者配伍未见协同或拮抗作用。由于芍药甘草汤及其组分可能抑制细胞转运子P-gp。因此，当芍药甘草汤与作为P-gp底物的药物联合用药时，有可能提高P-gp底物的吸收转运，一方面可能降低细胞对P-gp底物的耐药性，提高药效（例如在抗肿瘤治疗中增强疗效）。但另一方面，也可能由于药物吸收的增加而产生毒副作用。