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目的:通过体外培养过表达SOCS1的未成熟DCs(imDCs),并将不同类型的DCs及不同浓度的DC-SOCS1回输干预COPD小鼠,观察其BALF及肺组织中Th17细胞因子的变化,进一步阐明过表达SOCS1的imDCs通过调节Th17分泌的相关细胞因子在COPD免疫调节中的作用。方法:1、从小鼠胫骨和股骨中洗出骨髓细胞,用白介素-4、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子诱导im DCs形成。2、用过表达SOCS1的慢病毒感染原代分离培养第5天但未经LPS刺激的imDCs,构建过表达SOCS1的imDCs,即DCs-SOCS1,WB检测DCs-SOCS1内SOCS1的表达。3、细胞培养第7天加入LPS诱导成熟,对所培养的细胞,通过流式细胞术和扫描电镜分别对其表面分子标记物CD80、CD83和细胞形态进行鉴定。4、将42只C57BL/6小鼠随机分成7个组,每组6只,分别为烟熏第1天回输NS组,烟熏第1天回输DCs-SOCS1(1×10~6)组,烟熏第1天回输DCs-SOCS1(2×10~6)组,烟熏第1天回输imDCs(1×10~6)组,烟熏第7天回输DCs-SOCS1(1×10~6)组,烟熏第7天回输DCs-SOCS1(2×10~6)组和烟熏第7天回输imDCs(1×10~6)组。使用烟熏法建立COPD小鼠模型,实验第4周(28天)最后一次烟熏24小时内处死各组小鼠,并收集小鼠BALF及肺组织。使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF、肺组织中Th17相关细胞因子(IL-21)及IL-21/TGF-β变化。结果:1.小鼠骨髓源性im DCs成功获取、培养及鉴定;2.携带SOCS1慢病毒成功感染im DCs;3.DCs-SOCS1内SOCS1蛋白表达水平增高;4.imDCs和DCs-SOCS1过继免疫对COPD小鼠BALF及肺组织中Th17分泌的细胞因子IL-21,及IL-21/TGF-β比值的影响。(1)与空白对照组相比,COPD烟熏建模第1天回输1×10~6imDCs、1×10~6DCs-SOCS1,BALF及肺组织中IL-21分泌均明显降低(P<0.01),COPD烟熏建模第7天回输1×10~6imDCs、1×10~6DCs-SOCS1,BALF及肺组织中IL-21明显降低(P<0.01)。(2)分别于COPD烟熏建模第1天和第7天回输2×10~6DCs-SOCS1,与空白对照组相比,BALF及肺组织中IL-21浓度均降低(P<0.01)。(3)与COPD烟熏建模第1天和第7天回输1×10~6DCs-SOCS1相比,回输2×10~6DCs-SOCS1,BALF及肺组织中IL-21分泌均减少(P<0.01)。(4)与空白对照组相比,COPD烟熏建模第1天回输1×10~6imDCs、1×10~6 DCs-SOCS1、2×10~6 DCs-SOCS1,BALF及肺组织中IL-21/TGF-β均明显降低(P<0.01),COPD烟熏建模第7天回输1×10~6imDCs、1×10~6 DCs-SOCS1、2×10~6 DCs-SOCS1,BALF及肺组织中IL-21/TGF-β明显降低(P<0.01)。结论:1.经慢病毒转染可以获取过表达SOCS1蛋白的imDCs(DCs-SOCS1);2.imDCs、DCs-SOCS1均可抑制Th17细胞因子IL-21分泌水平,且DCs-SOCS1效果更明显;3.DCs-SOCS1抑制炎症因子释放与其浓度有关;4.DCs-SOCS1可以调节Th17/Treg失衡。