包装饮用泉水食源性致病菌分布规律和遗传多样性研究

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本研究通过对广东省矿泉水和山泉水生产中铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、粪链球菌(Enterococcus faecalis)和亚硫酸盐还原梭菌(spore-formingsulphite-reducing anaerobes)进行污染调查,对分离的铜绿假单胞菌和粪链球菌进行相关危害研究,同时通过基因分型构建了该两种菌分离株的指纹图谱,旨在找出其内在关联,为评估饮用水安全、控制微生物污染以及加强饮用水安全提供科学依据。主要结果如下:(1)广东省矿泉水和山泉水生产中铜绿假单胞菌的污染率为20.9%,其中水源水、碳后水和成品水的污染率分别为25.0%、32.3%和4.6%;粪链球菌的污染率为17.0%,水源水、碳后水和成品水的污染率分别为26.3%、20%和3.1%;亚硫酸盐还原梭菌的污染率为24.76%,水源水、碳后水和成品水的污染率分别为39.5%、30.8%、1.5%。生产中,致病菌的污染情况差别较大,无论是水源水、碳后水还是成品水,矿泉水的污染程度均低于山泉水。此外,山泉水的地表水源污染程度高于地下水源。(2)通过对43株铜绿假单胞菌的毒力基因分析,toxA、phzM、lasB、exoU和exoS的检出率分别为93.0%(40/43)、100%(43/43)、100%(43/43)、20.9%(9/43)和79.1%(34/43),分离株毒力基因分布较广泛,致病性较强。药敏试验结果未发现耐药菌株的存在,表明从广东省矿泉水和山泉水中分离得到的菌株,虽具有较高的致病性,但具有良好的可控性。运用ERIC-PCR和RAPD对铜绿假单胞菌进行溯源分析,结果表明两种方法均具有较高的分辨率,同时发现菌株的多样性,未能找出主要基因型。(3)通过对水中分离的35株粪链球菌进行研究,7种毒力基因ace、efaA、gelE、asa1、esp、cylA、hyl的检出率分别为80.0%(28/35)、100%(35/35)、97.1%(34/35)、42.8%(15/35)、8.6%(3/35)、5.7%(2/35)和0(0/35),毒力基因检出率较低,表明这些菌株相对安全、致病力弱。进而对粪链球菌进行ERIC-PCR分子分型,可将35株粪链球菌分为3个大簇共17种分型,发现广东的优势菌株主要集中在B簇。本研究首次成功取得了广东省矿泉水和山泉水致病菌的污染数据,并建立分型方法和完成分子分型,为今后本课题组继续进行饮用水微生物污染调查打下了良好的基础,同时对预防和控制饮用水中病原菌的污染更具针对性,效果也将会更加明显。
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