【摘 要】
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研究目的:通过构建舌癌阿霉素耐药细胞系(Tca8113/ADM),用蛋白印迹技术检测Tca8113/ADM及亲本细胞系Tca8113的去整合素-金属蛋白酶15(Adamalysin15,ADAM15)蛋白表达水平,并分
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研究目的:通过构建舌癌阿霉素耐药细胞系(Tca8113/ADM),用蛋白印迹技术检测Tca8113/ADM及亲本细胞系Tca8113的去整合素-金属蛋白酶15(Adamalysin15,ADAM15)蛋白表达水平,并分析其与Tca8113耐药性的关系,从肿瘤耐药的角度对舌癌的耐药与肿瘤转移相关蛋白ADAM15的关系进行初步探讨。方法:1、用人的舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,采用药物浓度梯度递增法,阿霉素持续诱导,历时15个月,成功构建舌癌Tca8113/ADM细胞系。2、舌癌Tca8113亲本细胞系作为对照组,阿霉素耐药细胞系Tca811/ADM作为实验组。用Western Blotting技术检测Tca8113/ADM及Tca8113亲本细胞系的ADAM15蛋白表达水平,并分析其与舌癌Tca8113耐药性的关系。结果:1、采用药物浓度梯度递增法持续给药诱导,连续培养15个月后,舌癌Tca8113细胞能够在含1.2ug/mlADM的培养液稳定生长。此时其耐药指数约为22.61。光镜下Tca8113/ADM细胞比亲本细胞胞体较大、较圆,胞核不规则,细胞内的颗粒增多,倍增时间延长。2、Tca8113亲本细胞系的ADAM15蛋白的表达的灰度与其对应的内参GAPDH的灰度比值平均为0.244±0.231。Tca8113/ADM细胞系的ADAM15蛋白的表达的灰度与其对应的内参GAPDH的灰度比值平均为1.217±0.494。两者比较有显著差异(P<0.01)。结论:1、采用浓度梯度递增法、持续给药诱导,成功构建舌鳞癌耐药细胞系Tca8113/ADM。2、由于ADAM15是癌转移的重要生物标志物,它在Tca8113/ADM细胞系的表达高于Tca8113亲本细胞系。提示舌癌的阿霉素耐药细胞系的转移性可能比其亲本细胞更强。
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