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染色体不稳定性（Chromosomal Instability，CIN）具体表现为染色体数目的改变和染色体结构的改变。课题组前期的研究中发现，随着人骨肉瘤细胞（U-2OS）在模拟微重力环境中生长时间逐渐延长，U-2OS细胞多极纺锤体发生率逐渐升高且细胞周期被阻滞在G2/M期，BUB1蛋白与MAD2蛋白的表达量也随之升高。为了进步研究模拟微重力效应对U-2OS细胞染色体不稳定性影响的分子机制，本课题首先利用RNA干扰技术以pSilencer4.1-CMV neo为载体构建出2个pSilencer4.1-CMV neo BUB1siRNA重组体。随后，将此重组体和课题组前期构建的pSilencer4.1-CMV neo MAD2siRNA重组体以及作为对照的乱序重组体分别转染入U-2OS细胞中筛选出对照组U-2OS细胞单克隆3个，U-2OS BUB1RNAi细胞单克隆4个，U-2OS MAD2RNAi细胞单克隆7个用于后续验当中。最后，将细胞置于模拟微重力系统中分别培养24小时、48小时和72小时后，对其多极纺锤体发生率、细胞周期以及DNA含量进行分析。研究结果表明，随着对照组U-2OS细胞在模拟微重力系统中培养时间的延长，其多极纺锤体发生率逐渐升高，而在相同环境中生长的BUB1/MAD2沉默后的U-2OS细胞，其多极纺锤体发生率逐渐下降。并且模拟微重力效应仍可将BUB1或MAD2蛋白被沉默后的U-2OS细胞阻滞在G2/M期，但是阻滞效果随模拟微重力时间的延长而降低。另外随着模拟微重力效应对BUB1或MAD2沉默后的U-2OS细胞作用时间的延长其DNA含量改变愈加明显。上述结果证明：BUB1和MAD2表达量的降低使模拟微重力效应下U-2OS细胞的染色体不稳定性增强。以上研究结果为进步探索模拟微重力效应对细胞染色体不稳定性影响的机制奠定了定的基础。