西洋参茎叶化学成分及人参皂苷溶血规律研究

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为了积累供溶血实验使用的人参皂苷单体,在西洋参茎叶提取物中分离得到23个化合物,已鉴定6个化合物,分别为人参皂苷-Rd(1)、-Re(2)、西洋参皂苷-La(3)、羽叶三七苷-F1(4)、人参皂苷-M6a(5)、珠子参苷-F1(6)。其中化合物西洋参皂苷-La(3)为新化合物,羽叶三七苷-F1(4)为首次从西洋参中分离得到的化合物。通过体外实验,用不同浓度的单体人参皂苷溶液和相同浓度的兔血红细胞悬浊液组成的混合溶液充分作用后,用比色法测定溶血度;不同浓度的单体人参皂苷溶液与相同浓度的Saponin皂苷溶液混合后加入相同浓度的兔血红细胞悬浊液,三者组成的混合溶液充分作用后,用比色法测定溶血度并计算保护溶血百分数。通过数理统计软件对数据进行分析并拟合人参皂昔溶血或保护溶血作用规律的曲线。对10种单体人参皂苷溶血、抗溶血作用进行研究,得到人参皂苷浓度与溶血度间的关系曲线,并分别求得各单体皂苷的半数溶血浓度(HD50)和半数保护浓度(P50),以此作为其溶血、抗溶血能力的指标。结果表明,在测定的人参皂苷各单体中分别或兼具有溶血和抗溶血的特性,且溶血和抗溶血能力各不相同。原人参皂苷三醇型人参皂苷Re、Rg1、20(R)-Rg2、20(S)-Rg2和Rh1都具有抗溶血溶血作用,其中20(R)-Rg2、20(S)-Rg2和Rh1在较高浓度时还表现出溶血作用;原人参皂苷二醇型人参皂苷-Rb1、Rb2、Rc和Rd均表现出抗溶血作用,其中Rd还在浓度较高时表现出了溶血作用。齐墩果酸型人参皂苷Ro在较低浓度便表现出抗溶血作用,未见溶血作用。根据各单体人参皂苷的溶血和抗溶血的不同特性,选择两种具有相反溶血作用的皂苷,以不同浓度混合后进行溶血实验测定,结果发现Rc和Rg1在对Saponin溶血作用时表现出了一定的抗溶血作用,虽然抗溶血能力不同,但都有随浓度增加而抗溶血作用增强的趋势,并且可以达到100%保护的能力;Rd在低浓度也可以表现出一些抗溶血作用,但在高浓度时表现出很强的溶血作用。在Rc和Rg1分别以不同比例和Rd混合的溶血实验中发现,单体皂苷混合后所表现出来的性质和其自身的性质并不一致,甚至可能与单体的性质相反。以单体皂苷溶血作用及能力作为基础,以主要成分为三七总皂苷的血塞通注射液为例,通过分离并添加的手段改变注射液中各种皂苷的比例构成变化,对不同比例构成的混合皂苷溶血作用进行研究,并且利用多元线性回归的统计学方对结果进行分析拟合,得到相应的回归方程Y=-14.726+0.16X1+0.013X2-0.212X3-0.001X4-0.059X5。此回归方程能够从整体上计算总皂苷中各成分含量变化对溶血作用的影响。
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