【摘 要】
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目的:探寻乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染对单核细胞来源的树突状细胞(dendritic cell, DC)自噬作用的影响,以及自噬的变化与树突状细胞表型变化的关系。方法:用免
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目的:探寻乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染对单核细胞来源的树突状细胞(dendritic cell, DC)自噬作用的影响,以及自噬的变化与树突状细胞表型变化的关系。方法:用免疫磁珠方法分选健康志愿者、慢性乙型肝炎病毒感染者外周血CD14+单核细胞,经诱导培养成为未成熟树突状细胞(immaturate dendritic cell, imDC)后,分别用单纯1640培养液(control组)、脂多糖(lipopolysaccharide, LPS) (LPS组)HepG2.2.15上清(HBV组)、HepG2上清(HepG2组)刺激imDC促使其成熟。用流式细胞检测术检测刺激后DC表型的变化,western blot、免疫荧光术检测自噬相关蛋白(LC3、Atg-5)变化情况。结果:培养10天后DC直径明显大于其前体单核细胞;其胞内的颗粒明显多于刚分选出来的单核细胞。正常人和HBV慢性感染者来源DC有相似的形态学发展过程。健康人来源的DC经HBV刺激后,与对照组相比较,表达HLA-DR及CD80、CD83、CD86增高,其中CD83的表达较LPS刺激后降低;慢性HBV感染者DC与对照组相比,高表达HLA-DR及CD80、CD86共刺激分子,低表达CD83分子(P<0.05)。免疫荧光共聚焦和、vestern blot检测显示,健康人来源和慢性HBV感染者来源的DC与未刺激组相比,在HBV刺激后自噬相关蛋白LC3、Atg-5表达均增高(P<0.05),与HBV刺激后HLA-DR、CD80、CD86表达水平增高变化相符。结论:持续的HBV感染对单核细胞发育的DC的形态和颗粒无明显影响。HBV感染DC后,细胞自噬作用增强,且能够使HLA-DR、CD80、CD86表达水平增高,CD83水平表达降低。
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