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目’的：1.研究P13K新型抑制剂BKM120对不同分子分型乳腺癌细胞系及相应干细胞的作用,观察BKM120对不同乳腺癌干细胞生物学特性的影响。2.研究BKM120联合多西紫杉醇对不同分子分型乳腺癌细胞系及相应干细胞的作用,观察BKM120联合多西紫杉醇用药对乳腺癌干细胞的影响。3.研究BKM120联合靶向治疗药物曲妥珠单抗对HER2阳性的SK-BR-3乳腺癌细胞系及相应干细胞的作用,观察BKM120联合曲妥珠单抗对乳腺癌干细胞的影响。4.研究BKM120联合多西紫杉醇在体内实验中对乳腺癌干细胞的作用。方法：1.体外细胞学实验：采用无血清培养液悬浮培养球囊细胞的方法富集相应乳腺癌细胞系干细胞,并经过流式验证其中ESA+CD44+CD24-/low细胞亚群比例。采用MTT法分别检测BKM120、多西紫杉醇、曲妥珠单抗等单药对不同乳腺癌细胞及其干细胞的生长抑制作用；检测BKM120联合多西紫杉醇、BKM120联合曲妥珠单抗对不同乳腺癌细胞和相应干细胞的生长抑制作用,计算药物联合指数。通过划痕实验观察单药和联合用药对不同乳腺癌细胞迁移能力的影响。进一步通过球囊形成实验分析单药和联合用药对不同分子分型乳腺癌细胞系球囊形成能力的影响。利用平板克隆实验检测单药和联合用药对不同分子分型乳腺癌细胞系克隆形成能力的影响,并分析其中的差异。采用免疫蛋白印记方法检测单药和联合用药对不同分子分型乳腺癌细胞及相应乳腺癌干细胞中AKT,pAKT,S6,pS6蛋白水平的影响。2.体内裸鼠移植瘤实验：成功建立裸鼠乳腺癌干细胞移植瘤动物模型。随机分组条件下,予以单药及联合用药,记录实验期间裸鼠移植瘤体积大小变化和裸鼠体重变化,观察药物在体内对乳腺癌干细胞的影响。结果：1.BKM120对乳腺癌细胞及干细胞的作用：在体外与对照组相比,BKM120对乳腺癌细胞及干细胞生长均具有一定的抑制作用,干细胞对BKM120具有一定的耐药性。抑制作用呈一定的浓度剂量依赖性。BKM120可以一定程度的降低乳腺癌细胞的迁移能力,减低乳腺癌细胞克隆形成能力,并可以显著的减少乳腺癌细胞的球囊形成,并呈一定的浓度剂量相关。一定作用浓度下,BKM120可以显著的降低乳腺癌干细胞和乳腺癌细胞中pAKT、pS6蛋白水平,并呈一定的浓度剂量依赖性。在体内实验中,一定剂量的BKM120可以抑制裸鼠乳腺癌干细胞移植瘤的增长,而不造成小鼠的体重明显下降。2.BKM120联合多西紫杉醇对乳腺癌干细胞和乳腺癌细胞的作用：经过药物联合指数计算,两药联合后呈激动作用。体外实验中与对照组、任一单药组相比,联合用药可进一步的抑制乳腺癌细胞的生长、降低乳腺癌细胞的迁移能力、减少乳腺癌细胞球囊的形成,降低乳腺癌细胞的克隆形成能力。与对照组及单药作用组相比,双药联合组更加明显的降低了乳腺癌细胞中pAKT,pS6等蛋白水平。体内实验中,与对照组及任一单药组相比,联合用药可更有效的遏制乳腺癌干细胞移植瘤的生长,同时未明显降低小鼠的体重。3.BKM120联合曲妥珠单抗对HER2阳性乳腺癌细胞及相应干细胞的作用：经过药物联合指数计算,两药联合后呈激动作用。体外实验中与对照组、任一单药组相比,联合用药可进一步的抑制乳腺癌细胞的生长、降低乳腺癌细胞的迁移能力、减少乳腺癌细胞球囊的形成,降低乳腺癌细胞的克隆形成能力。与对照组及单药作用组相比,双药联合组更加明显的降低了乳腺癌细胞中pAKT,pS6等蛋白水平。结论：1.P13K抑制剂BKM120对乳腺癌干细胞和乳腺癌细胞生长增殖均产生一定的抑制作用。2.BKM120联合多西紫杉醇在体内体外对乳腺癌干细胞生长增殖产生一定抑制作用。与单药组相比,联合用药可增强药物抗肿瘤作用,一定程度上克服乳腺癌干细胞对多西紫杉醇的耐药性。3.BKM120联合靶向药物曲妥珠单抗在体外对HER2阳性的乳腺癌干细胞和乳腺癌细胞均产生一定抑制作用。与单药组相比,联合用药可一定程度上增强药物抗肿瘤作用,克服Her2阳性乳腺癌干细胞对曲妥珠单抗的耐药性。