功能两亲性短肽的自组装及其与细胞的相互作用

来源 :中国石油大学(华东) | 被引量 : 0次 | 上传用户:abcchencj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
自组装多肽因具有良好的生物相容性和多样性的化学结构,逐渐引起人们极大的研究兴趣。但目前研究常用的多肽片段一般都是意外发现的或是来源于可以在生物体内组装的天然蛋白质。因此,通过合理地设计多肽使其具有特定的结构和功能是一个具有重要意义和挑战的工作。本论文设计合成了具有胰蛋白酶和基质金属蛋白酶7(MMP-7)响应片段的两种类型的功能性短肽,并对其在简单溶液中的自组装行为、酶响应性及与细胞的相互作用三个方面进行了研究。具体研究内容及结论如下:(1)水中Nap-FFNHCH2CH2OCOR9(Nap-FF-R9)分子在研究浓度下均表现为无规卷曲的二级结构,并且分子均呈现无规聚集体结构;在缓冲溶液中,随着多肽分子浓度的增加,分子二级结构中无规卷曲含量减少,而β-sheet含量升高,在较高浓度时多肽分子形成规则的纳米纤维状结构。(2)Nap-FF-R9在胰蛋白酶的作用下分子中精氨酸残基碳侧的酰胺键发生断裂,释放具有很强组装能力的Nap-FF-NHCH2CH2OCO-R(Nap-FF-R)片段,并且胰蛋白酶的加入可以显著改变体系的自组装行为,得到长度更长的纳米纤维的结构。(3)MTT实验得出Nap-FF-R9分子浓度在55μM以上时对Hela细胞和NIH3T3细胞均具有高效的杀伤效果。染色实验表明与Nap-FF-R9分子作用后Hela细胞的细胞膜破损、细胞核固缩、细胞骨架团聚。Nap-FF-R9与模拟细胞膜相互作用的实验表明静电作用在分子破坏细胞膜过程中的影响可能比疏水作用大。通过调整分子中的氨基酸残基改变分子的亲疏水性得到分子I3G3R9和R9,其与细胞作用得出Nap-FF-R9分子的两亲性可能是杀死细胞的重要因素。(4)Nap-FFGPLGLARK在水中、Nap-FFKPLGLARK和Nap-FFGPLGLARKRK在水中及缓冲溶液中的聚集体的二级结构均是随着溶液浓度的不断增大由无规卷曲向β-sheet转变,相应的组装体形貌由无规聚集体向规则的纤维结构转变。其中Nap-FFGPLGLARK在缓冲溶液中的溶解度非常小,限制其研究。(5)Nap-FFGPLGLARK、Nap-FFKPLGLARK和Nap-FFGPLGLARKRK在MMP-7的作用下其甘氨酸和亮氨酸之间的酰胺键均可发生断裂,释放出相应的组装基元Nap-FFGPLG、Nap-FFKPLG和Nap-FFGPLG。加酶条件下,相对于不加酶条件下组装体,由于Nap-FFGPLGLARK分子酶解转化率不高,酶解产物组装体形貌变化不明显;而Nap-FFKPLGLARK酶解产物的组装体纤维更长;Nap-FFGPLGLARKRK酶解产物的组装体纤维的直径更小,但是可以排列形成宽度更宽的纤维簇,并具有类似结晶体的结构。(6)Nap-FFKPLGLARK与He La细胞、NIH 3T3细胞、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌和绿脓杆菌作用表明,浓度在100μM时该多肽分子可以选择性杀伤金黄色葡萄球菌。Nap-FFGPLGLARKRK在浓度较低时对HeLa细胞、NIH 3T3细胞几乎没有毒性,浓度较高时对其均有较高的杀伤效果。
其他文献
我们使用庆大霉素、地塞米松局部用药治疗急性外耳道炎100例,显效快,疗效高,无副作用。现介绍如下。1 临床资料 本组病例中,男63例,女37例;年龄2~71岁;病程1~12天。其中因挖耳
河北省第十三届人民代表大会第三次会议审查了省人民政府提出的《关于河北省2019年国民经济和社会发展计划执行情况与2020年国民经济和社会发展计划草案的报告》,审查了2020年
报纸
目的探讨超声甲状腺影像学报告及数据系统(TI-RADS)分级对乳头状甲状腺癌的诊断价值。方法选取2015年3月~2017年6月珠海市人民医院诊治的乳头状甲状腺癌患者80例为研究对象,另
各位代表:$$ 现在,我代表州人民政府向大会报告工作,请审议,并请各位政协委员和列席人员提出意见建议。$$ 2014年工作回顾$$ 过去的一年,在省委、省政府的亲切关怀
报纸
随着科技的发展,网络信息化时代迅速到来,网络的发展在给我们的生活带来便利的同时,也影响着我国教育的发展,给我国的教育事业带来了新的机遇和挑战。本文将根据网络信息化环
2018年9月,习近平在中共中央政治局第八次集体学习会议上强调,要突出抓好农民合作社和家庭农场两类农业经营主体的发展,不断提高农业经营效率。农民专业合作社肩负着农业现代化建设的重要任务,对加强农村欠发达地区的经济发展活力有积极的推动作用,因此合作社的建设发展需要社会各部门的扶持,特别是金融支持。本文以河南省为例,利用实证分析来研究合作社的金融支持效率问题,试图丰富国内关于合作社金融支持理论的内容,
<正>湛山寺位于青岛市区湛山南麓,依山面海,风景秀丽,是天台宗最年轻的名刹,建于20世纪30年代,系天台宗第44代传人倓虚主持兴建。第一期工程于1934年4月开工,同年9月落成,兴
软件工程课程是计算机相关专业的重点课程,其教学内容较多,教学难度大,急需改革。论文将支架教学法引入软件工程课程教学过程中,有效地改善了传统教学中出现的问题,为计算机
<正> 水解是有机氯硅烷变成有机聚硅氧烷的一个特别重要的步骤。最简单的传统水解方法,是将有机氯硅烷滴加入过量水中。此时,有机氯硅烷与水发生激烈的水解反应,生成不稳定的
随着信息技术的不断发展,非线性系统状态估计已逐渐成为一个受到国内外学者重视的热点研究课题。但随着实际应用对模型的复杂性不断提高,传统的滤波方法已无法满足滤波精度的