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[目的]
探讨二氧化碳(CO2)气腹在相同压力不同气腹时间作用下对裸鼠卵巢癌移植瘤组织中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4表达的影响,为临床上腔镜手术治疗卵巢恶性肿瘤疗效提供实验依据。
[方法]
采用腹腔注射卵巢癌细胞株建立裸鼠卵巢癌腹腔移植瘤模型,随机分为四组,每组10只裸鼠:①单纯麻醉组;②开腹0.5h组;③CO2气腹0.5h组;④CO2气腹1h组。SKOV3细胞接种12周后脱臼处死全部裸鼠,取出肿瘤组织,采用实时荧光定量PCR(Real Time-PCR)和免疫组织化学方法观察肿瘤组织中CXCL12/CXCR4的mRAN和蛋白的表达情况,采用SPSS17.0软件进行统计学分析,各组间的肿瘤生长情况或基因表达情况的比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),两两比较采用LSD进行多重检验,相关性分析采用Spearman秩相关分析方法。
[结果]
1.成功建立了裸鼠移植瘤模型:卵巢癌细胞SKOV3接种裸鼠腹腔12周后处死裸鼠,结果各组裸鼠体内可见明显的肿瘤生成,并且术后均无裸鼠死亡。
2.免疫组织化学染色结果表明:在各组肿瘤组织切片中均可见CXCL12/CXCR4蛋白的阳性表达,主要位于细胞核,显示为棕黄色至棕褐色颗粒,且在各组间的表达无统计学差异(P>0.05);但各组间两种蛋白的表达无统计学差异(P>0.05); CXCL12与CXCR4蛋白表达之间呈正相关(Rs=0.484,P<0.05)。
3.实时荧光定量PCR的结果表明:肿瘤组织中CXCL12/CXCR4的mRNA表达水平在C02气腹1h组最高,与单纯麻醉组、开腹0.5h组、CO2气腹0.5h组之间有统计学差异(P<0.05)。CXCL12和CXCR4的mRNA表达之间呈正相关(Rs=0.784,P<0.05)。
[结论]
1.趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在裸鼠卵巢癌移植瘤组织中均成阳性表达;
2.二氧化碳(CO2)气腹对裸鼠卵巢癌移植瘤中CXCL12/CXCR4蛋白水平的表达无明显影响,但CO2气腹时间的延长可显著增强CXCL12和CXCR4的mRNA水平的表达。