论文部分内容阅读
目的:探讨羟基磷灰石-p53复合物转染鼻咽癌细胞的效果。方法:透射电镜观察经过非病毒型基因载体聚乙烯亚胺(Polye-thylenimine,PEI)等表面活性剂处理的羟基磷灰石(hydroxyapatite,简称HA或HAT)(以下简称PEI-HAT)纳米颗粒载体的形态,并在室温下观察其悬浮稳定性;测定PEI-HAT纳米颗粒与人鼻咽癌细胞(CNE-1细胞)的生物相容性;观察了PEI的细胞毒性;并探讨PEI-HAT纳米颗粒在不同浓度条件下的DNA结合能力以及羟基磷灰石-p53复合物转染鼻咽癌细胞的能力。结果:透射电镜观察PEI-HAT纳米颗粒发现,颗粒的分散性好,有轻微程度的团聚现象;它在室温下具有良好的悬浮稳定性;细胞克隆集落实验证实PEI-HAT纳米颗粒在浓度高于500μg/ml时表现出明显的细胞毒性,在300～500μg/ml之间细胞毒性不等,300μg/ml以下基本无细胞毒性;PEI细胞毒性实验发现浓度大于10μg/ml时有很强的细胞毒性,5μg/ml时细胞毒性最小;凝胶电泳阻滞实验显示在广泛的浓度值内PEI-HAT纳米颗粒与DNA具有很好的结合能力;在转染实验中羟基磷灰石-p53复合物只有在175μg/ml、200μg/ml、250μg/ml、300μg/ml时可见转染荧光,在人鼻咽癌上皮细胞(CNE-1细胞)中的转染效率约为2%。对照组LP2000在CNE-1细胞中转染效率约为60%。结论:PEI-HAT纳米颗粒载体的分散性好,在室温下具有良好的悬浮稳定性;PEI-HAT纳米颗粒载体在不同浓度与DNA的结合能力强,且具有一定的细胞毒性;羟基磷灰石-p53复合物在转染时有团聚现象且只有少量转入人鼻咽癌CNE-1细胞中,转染效率不理想,这有待于今后更进一步的研究。