论文部分内容阅读
类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是以关节慢性炎症为特征的自身免疫性疾病。虽然RA的确切发病机制还不清楚,但是T细胞、B细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞和滑膜成纤维细胞在关节发炎及疾病发展的过程中处于重要地位。细胞因子、Th1/Th2细胞平衡、细胞凋亡等在RA的发病过程中也起着重要作用。RA与滑膜组织中多种淋巴细胞及滑膜成纤维细胞凋亡不足有关,因此诱导这些细胞凋亡防止其过度增殖成为治疗RA的有效途径。TRAIL(TNF related apoptosis inducing ligand)为Ⅱ型跨膜蛋白,属于TNF超家族。TRAIL能诱导表达TRAIL特异性受体的细胞发生凋亡。DR5又称TRAIL-R2,是TRAIL的特异性受体,在多种肿瘤组织中高表达。而TRAIL给药后造成严重的肝毒性,限制了它的应用。本实验室通过可溶性DR5(sDR5)免疫小鼠,建立杂交瘤细胞系,筛选出能诱导细胞凋亡的抗DR5单克隆抗体。该单克隆抗体与DR5特异结合,不与其他FRAIL受体交叉反应。而且该单抗能特异性诱导一些表达DR5的肿瘤细胞凋亡。为了研究Anti-DR5 mAb对大鼠佐剂型关节炎(AA)的作用及其免疫机理,本实验采用注射弗氏完全佐剂的方法建立了佐剂型关节炎(AA)大鼠模型,尾静脉注射Anti-DR5 mAb,观察大鼠关节肿胀度、血清和滑膜液中炎症细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平的变化。另外,利用RT-PCR检测各组织器官、滑膜和淋巴细胞中DR5 mRNA水平的表达,以Western blot技术分析各组织器官中凋亡相关因子Caspase-8、Bcl-2蛋白的表达情况。实验发现Anti-DR5 mAb能缓解AA病情,使关节肿胀度降低。用Anti-DR5mAb治疗后,血液和滑膜组织细胞产生IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平下降,且抑制了滑膜细胞和淋巴细胞的过度增殖。因此,本实验室制备的Anti-DR5 mAb能用于大鼠AA的治疗,其治疗机制与细胞表面DR5 mRNA的表达、细胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平和Caspase-8蛋白表达有重要关系。