山羊皮肤发育形态学和免疫组织化学研究

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为了解山羊皮肤组织发生发育规律及β1整合素、表皮生长因子及受体在发育过程中的表达及其功能意义,以探讨皮肤组织发生过程中表皮干细胞和细胞因子的分布规律。本研究以6~18周龄的山羊胎儿皮肤为试验材料,采用组织学常规石蜡制片技术,苏木精-伊红染色和Masson三色染色方法详细研究了山羊皮肤组织发生发育过程中的形态结构和变化规律,并结合透射电镜观察了不同发育时期的山羊胎儿皮肤的超微结构变化特点;在了解皮肤组织发生发育特点和规律的基础上,进一步运用免疫组织化学SP法对山羊皮肤发育过程中β1整合素、表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)及其受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)的分布及变化规律进行了系统的研究。结果如下:1. 6~7周龄的山羊胎儿皮肤表面平整,出现一层单层扁平上皮的表皮结构;8周龄时变为单层柱状上皮;9周龄时表皮增生为表层与生发层两层,表皮与间充质之间以基膜相连;10周龄时表皮分为表层、中间层和生发层三层,真皮层开始出现,与表皮分界明显,其中含有少量胶原纤维和弹性纤维,在局部还可见到基底层细胞围成的团状实心细胞群向间充质内突出形成的毛芽;11周龄,表皮继续增厚,深层细胞内出现少量张力原纤维,并发现朗格罕斯细胞,表皮内还可见到原始毛囊及其附近形成的实心细胞索即汗腺;12~13周龄,表皮细胞出现角化层、透明层及颗粒层的分化,可见明显的汗腺,真皮乳头层形成,真皮内胶原纤维的合成明显增多;14~15周龄,表皮深层细胞内张力原纤维增多、变粗,并发现典型的桥粒结构,毛球上皮细胞索开始分化为外根鞘、内根鞘的原基和毛发的前体,在毛囊的两侧可见皮脂腺和竖毛肌,真皮内胶原纤维继续增多,深部可见较多汗腺分泌部的断面;16~17周龄,表皮层开始变薄,毛开始形成,并随着发育逐渐长出体表,真皮层内胶原纤维和弹性纤维增多,真皮层厚度加大;18周龄以后,皮肤及其衍生物结构继续发育,渐趋完善。2.在胎儿发育第6周就出现EGF与EGFR的较弱表达,以后随着胎龄的增加,EGF与EGFR的表达呈不断增高的趋势。从分布部位来看,在胎儿发育的11周前,EGF阳性反应主要定位于表皮基底层细胞、毛囊上皮细胞和成纤维细胞等的胞浆内,EGFR则主要位于相应部位细胞的胞膜上;11~16周,随着胎儿的生长发育EGF和EGFR的表达量增高,分布也更广泛,从表皮的基底层、棘细胞层、真皮的毛囊细胞和成纤维细胞扩展到血管的内皮细胞、汗腺上皮细胞和竖毛肌,EGF主要定位于这些细胞的胞质,EGFR则主要分布于这些细胞的膜上;17周至出生,随着表皮的明显变薄,EGF主要分布于基底层细胞和毛囊上皮细胞,阳性反应继续增强。3.胎儿发育的第8周,表皮呈现较弱的β1整合素(β1-integrin)阳性反应;9~10周,β1-integrin阳性产物主要出现于表皮深层细胞的胞质内;11~13周,β1-integrin的分布范围逐渐涉及到表皮的各层结构;14~16周,随着胚胎发育进程,β1-integrin的分布范围扩大至毛囊隆突区、外根鞘和汗腺上皮细胞,表皮细胞的阳性反应逐渐减弱;17周后随着表皮的变薄,β1-integrin在表皮的分布只限于基底层的局部,其它部位的阳性细胞数量逐渐减少,而毛囊隆突区和外根鞘部的表达继续增强。
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