【摘 要】
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柑橘溃疡病(Citrus Bacterial Canker，CBC)是由地毯草黄单胞杆菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv．citri，Xac)引起的一种影响全球柑橘产业发展的国内外重大检疫性病害。
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柑橘溃疡病(Citrus Bacterial Canker，CBC)是由地毯草黄单胞杆菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv．citri，Xac)引起的一种影响全球柑橘产业发展的国内外重大检疫性病害。其主要通过带菌种苗、接穗、果实等柑橘材料的调运进行远距离传播，田间病害主要靠病菌随风夹雨扩散，病菌在自然状态下的存活期较长。对于该病的检疫检验，除传统的方法外，近年来国外已发展了PCR等分子检验技术，但并不能满足口岸及基层植保站对柑橘溃疡病的快速筛查。我国加入WTO以后，柑橘溃疡病检疫的新形势迫切要求建立一种快速、灵敏、准确的适合口岸及基层检验检疫部门的检验技术体系。 本研究的目的是通过家兔免疫获得柑橘溃疡病多克隆抗体，用于标记纳米级的胶体金颗粒和包被硝酸纤维素膜(Nitrocellulose membrane)，并结合层析技术制备检测柑橘溃疡病菌的胶体金免疫层析(Colloidal gold immunochromatograohic assay，CIA)测试卡，最终建立起快速准确而又稳定安全的柑橘溃疡病菌胶体金免疫层析快速检测技术体系，其可用于大量柑橘样品的快速检验，为柑橘非疫生产区建设和病害预警监测提供一种快速检测技术和实用工具。 研究首先利用柑橘溃疡病全胞菌免疫家兔获得高免血清，提纯出柑橘溃疡病菌多克隆抗体；而后用柠檬酸三钠还原氯金酸法制备30nm的胶体金颗粒，将胶体金溶液的pH值调节至9.0，加入柑橘溃疡病菌多克隆抗体20μg／ml，用磁力搅拌器连续搅拌1h，制备出金标抗体；再通过高速离心纯化金标抗体；结合免疫层析技术制成测试卡；通过对浓度10~1-10~8cfu／ml柑橘溃疡病菌菌悬液的检测，测出测试卡的灵敏度；通过对不同细菌及柑橘表面的腐生菌的检测，测出测试卡的特异
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