【摘 要】
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目的:探讨血管紧张素Ⅱ-CaMK-CREB-CYP11B2和肾上腺素-PKA-CREB-CYP11B2途径在应激性高血压发病中的作用及缓压乐复方制剂干预作用机制。方法:(1)领取6-8W鼠龄的雄性SPF级70只Wistar大鼠，适应性喂养7d后，按照随机方法分为正常组、SIH模型组、药物干预组(缓压乐复方制剂)和阴性对照组(蒸馏水)。除正常组外其余三组大鼠给予复合应激刺激(间断足底电刺激及声、光刺
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目的:探讨血管紧张素Ⅱ-CaMK-CREB-CYP11B2和肾上腺素-PKA-CREB-CYP11B2途径在应激性高血压发病中的作用及缓压乐复方制剂干预作用机制。方法:(1)领取6-8W鼠龄的雄性SPF级70只Wistar大鼠，适应性喂养7d后，按照随机方法分为正常组、SIH模型组、药物干预组(缓压乐复方制剂)和阴性对照组(蒸馏水)。除正常组外其余三组大鼠给予复合应激刺激(间断足底电刺激及声、光刺激)12W后并予以相应的药物干预4W，正常组大鼠常规喂养不给予刺激。(2)光镜下观察肾上腺病理学变化，放射免疫法检测SIH模型大鼠血浆血管紧张素Ⅱ含量，酶联免疫吸附(ELISA)方法检测SIH模型大鼠及缓压乐复方制剂干预后大鼠血清肾上腺素含量;(3)RT-qPCR方法检测SIH模型大鼠肾上腺组织Creb、Nr4a1、Nr4a2、Cyp11b2、Th基因及缓压乐复方制剂干预后大鼠肾上腺组织Creb、Cyp11b2、Th基因mRNA表达水平;(4)免疫组织化学方法检测SIH模型大鼠与缓压乐复方制剂干预后大鼠肾上腺组织CREB磷酸化水平、CYP11B2蛋白表达水平及THser40磷酸化水平变化。结果:(1)相比于正常组，SIH模型组大鼠收缩压与舒张压均明显升高(P＜0.05)，肾上腺皮质球状带细胞及髓质嗜铬细胞增生明显，血浆血管紧张素Ⅱ含量无明显变化(P＞0.05)，血清肾上腺素含量明显升高(P＜0.05)，肾上腺组织Creb基因mRNA表达水平明显上调(P＜0.05)，Nr4a1与Nr4a2基因mRNA表达水平无明显变化(P＞0.05)，Cyp11b2基因mRNA表达水平明显上调(P＜0.05)，TH基因mRNA表达水平明显下调(P＜0.05)，肾上腺皮质CREB磷酸化水平明显上调(P＜0.05)，肾上腺髓质CREB磷酸化水平变化无统计学意义(P＞0.05)，皮质CYP11B2蛋白表达水平及髓质THser40磷酸化水平明显上调(P＜0.05);(2)经缓压乐复方制剂干预后，相比于阴性对照组，药物干预组大鼠收缩压与舒张压明显下降(P＜0.05)，肾上腺皮质球状带细胞及髓质嗜铬细胞增生无明显缓解现象，血清肾上腺素含量无明显变化(P＞0.05)，肾上腺组织Creb、Cyp11b2基因mRNA表达水平明显下调(P＜0.05)，Th基因mRNA表达水平无明显变化(P＞0.05)，肾上腺皮质CREB磷酸化、CYP11B2蛋白表达及髓质THser40磷酸化水平明显下调(P＜0.05)。结论:(1)肾上腺素-PKA-CREB-CYP11B2途径的激活是SIH模型大鼠血浆醛固酮和血压升高的主要原因之一。复合应激因素诱导的高血压大鼠模型中PKA-TH-肾上腺素、肾上腺素-PKA-CREB-醛固酮途径处于活化状态。(2)经缓压乐复方制剂干预后，CREB活性的下调可能是缓压乐复方制剂干预模型大鼠醛固酮合成关键酶基因Cyp11b2转录活性、血浆醛固酮含量及血压降低的主要原因之一。
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