肺组织低氧代谢中GLUT1和AMPKα1的表达及其作用的实验研究

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第一章肺组织低氧代谢中葡萄糖转运蛋白1的表达及其作用的实验研究目的探讨单肺通气对大鼠肺组织葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的影响。方法30只Sprague Dawley大鼠10水合氯醛4.5mL/kg腹腔注射麻醉后行气管插管术,建立单肺通气(One-lung Ventilation, OLV)模型将大鼠模型随机分为对照组(n=6)与实验组(n=24),对照组大鼠采用主支气管插管双肺通气;实验组大鼠均为右主支气管插管通气,左侧肺不通气,按左侧肺不通气时间随机分为实验0.5h组、实验1.0h组、实验2.0h组及实验4.0h组,每组6只。采用透射电子显微镜观察大鼠II型肺泡上皮细胞(AEC II)超微结构,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠肺组织GLUT1mRNA的表达情况。结果对照组AEC II细胞核内染色质分布均匀,细胞质内板层小体圆形且密度均匀,微绒毛清晰。各实验组AEC II的细胞核染色质、细胞质内板层小体、细胞膜及微绒毛等有不同程度的改变。与对照组比较,实验0.5h组、实验1.0h组大鼠肺组织GLUT1mRNA表达量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,实验2.0h组大鼠肺组织GLUT1mRNA表达量略有降低,但差异无统计学意义(P>0.05);实验4.0h组大鼠肺组织GLUT1mRNA表达量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组两两比较,除实验1.0h组与实验0.5h组大鼠肺组织GLUT1mRNA的表达差异无统计学意义外(P>0.05),其余各组,差异均有统计学意义(P<005)。结论在低氧代谢环境条件下,肺组织GLUT1mRNA的上调表达,以满足肺组织低氧代谢能量的摄取,对AECII起到保护作用。第二章GLUT1和AMPKα1在肺低氧代谢中表达及作用机制目的探讨在单肺通气中大鼠肺组织葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和腺苷酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1)表达及作用。方法240±20g SD大鼠30只,随机分为5组(n=6),空白对照组(E组),1/2h单肺通气(One-lung Ventilation, OLV)组(A组),1h单肺通气组(B组),2h单肺通气组(C组),4h单肺通气组(D组)。E组采用气管切开后插入主支气管行双肺通气,实验A、B、C、D组采用单腔管过深插入右主支气管行右侧肺通气建立单肺通气模型,通过用ELISA法检测血清中GLUT1和AMPKα1的蛋白表达情况,Western blot技术对大鼠非通气侧肺组织检测GLUT1和AMPKα1的蛋白表达情况。结果实验组血清中GLUT1和AMPKα1的蛋白相对含量与对照组相比无明显差异(P>0.05),实验组肺组织中GLUT1和AMPKα1的蛋白相对含量与对照组相比无明显差异(P>0.05)。结论在实验时间内低氧代谢对大鼠肺组织中GLUT1AMPKα1的蛋白表达没有显著的影响。
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