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目的循环肿瘤标志物有助于诊断早期原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC),然而目前辅助临床诊断的HCC标志物并不令人满意,主要问题在于其准确性、灵敏性和特异性均较低。循环微小RNA(microRNAs,miRNAs)的研究方向带来了新的思路。本研究探讨mi R-125b、miR-223、miR-27a和mi R-26a作为HCC血清标志物的可能性和临床价值。通过联合检测来提高筛查诊断早期HCC的准确性、灵敏性和特异性。方法选取天津医科大学肿瘤医院90例原发性乙肝肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关的HCC患者为实验组(HCC组),30例健康志愿者(健康对照组)和30例HBV患者(HBV组)为对照组。分别采用巴塞罗那分期(Barcelona Clinic Liver Cancer,BCLC)和TNM(Tumor-node-etastasis)分期系统定义早期HCC患者。通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组的血清miR-125b、miR-223、mi R-27a和miR-26a,并采用2-△△Ct进行mi RNAs相对表达量分析。利用R 3.1软件完成统计分析。单一指标筛查之后,通过logistic回归模型实现多指标联合诊断HCC和早期HCC,并应用于健康对照组、HBV组,以及非癌症组(健康对照组+HBV组)中进行受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析,确定各指标诊断的灵敏性和特异性,并由Bootstrap确定构建模型的稳定性。结果1.分别与健康对照组和HBV组相比,HCC患者血清中的miR-125b、miR-223、miR-27a和miR-26a相对表达水平降低(P<0.0001)。2.以非癌症组为对照,单一mi RNA筛查诊断HCC效能最好的是miR-27a,AUC为0.849,灵敏性为73.0%,特异性为85.0%;联合四种miRNAs诊断的AUC提高为0.870,灵敏性提高为79.8%,特异性为81.7%。以健康对照组为对照,单一miRNA筛查诊断HCC效能最好的是miR-27a,AUC为0.930,灵敏性为94.0%,特异性为77.0%;联合四种miRNAs诊断的AUC提高为0.970,灵敏性为94.0%,特异性提高为90.0%。以HBV组为对照,单一miRNA筛查诊断HCC效能最好的是miR-223,AUC为0.826,灵敏性为73.0%,特异性为83.3%;联合四种miRNAs诊断的AUC提高为0.833,灵敏性提高为82.0%,特异性为76.7%。3.基于BCLC分期,以非癌症组为对照,单一miRNA筛查诊断早期HCC效能最好的是miR-223,AUC为0.793,灵敏性为70.4%,特异性为81.7%;联合四种miRNAs诊断的AUC提高为0.843,灵敏性提高为81.5%,特异性为75.0%。以健康对照组为对照,单一miRNA筛查诊断早期HCC效能最好的是miR-27a,AUC为0.920,灵敏性为81.0%,特异性为90.0%;联合四种miRNAs诊断的AUC提高为0.960,灵敏性为80.0%,特异性提高为100.0%。以HBV组为对照,单一miRNA筛查诊断早期HCC效能最好的是miR-223,AUC为0.809,灵敏性为74.1%,特异性为83.3%;联合四种miRNAs诊断的AUC提高为0.812,灵敏性为70.4%,特异性为83.3%。4.基于TNM分期,以非癌症组或HBV组为对照,单一和联合四种miRNAs筛查诊断早期HCC效能均不令人满意。以健康对照组为对照,单一miRNA筛查诊断早期HCC效能最好的是miR-27a,AUC为0.860,灵敏性为92.3%,特异性为73.3%;联合四种miRNAs诊断的AUC提高为0.920,灵敏性为92.3%,特异性提高为83.3%。5.经统计分析验证,构建的诊断模型和风险分析模型稳定。这四种miRNAs的相对表达量越低,患HCC风险越大。结论1.与对照组相比,本研究确定了在HCC患者血清中的miR-125b、miR-223、miR-27a、mi R-26a相对表达水平显著降低。2.四种miRNAs联合检测能够显著地提高诊断HCC和早期HCC的灵敏性、特异性和准确性。3.四种miRNAs相对表达量与非癌症人群患HCC风险呈负相关。有望用于临床,成为新的诊断早期HCC的血清标志物。