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本课题研究利用金磁微球法提取得到拟南芥总RNA，然后利用RT-PCR法克隆出4CL(4CL)基因cDNA序列，构建了其克隆载体Pgem-Easy-4CL。通过测序对其进行序列分析后，进一步构建其毕赤酵母表达载体pPIC3.5K.4CL，然后利用电击法转化毕赤酵母GSll5，经甲醇诱导重组酵母表达，取得了如下进展：
利用RT-PCR法从拟南芥中扩增出4-香豆酸：辅酶A连接酶基因编码序列，构建了克隆载体Pgem-TEasy-4CL。通过PCR和酶切初步鉴定J下确后，对其进行测序，测序结果和NCBI中登陆号为NM_001 084228.1的4CLcDNA序列比对，同源性为99％。表明4-香豆酸：辅酶A连接酶基因已经成功克隆并连接至克隆载体Pgem-Teasy中。
设计分别带有BamtH和Not I两个酶切位点的4-香豆酸：辅酶A连接酶基因引物，以Pgem-Teasy-4CL为模板，扩增出5端和3端分别带有BamHI和Not I两酶切位点的4CL基因，然后用这两种酶切后连接至毕赤酵母表达载体pPlC3.5K中。重组表达载体Ppic3.5K.4CL。转化大肠杆菌DH5a并利用其上携带的氨苄青霉素抗性基因筛选出抗性菌株，然后做PCR及双酶切鉴定。经鉴定4-香豆酸：辅酶A连接酶基因已经准确地连接到毕赤酵母表达载体Ppic3.5K中。
用电转化法将重组酵母表达载体Ppic3.5K-4CL，导入甲醇型酵母(P.Pastoris)菌株GSll5中，获得转化子。将转化子采用营养缺陷、遗传霉素、PCR等方法筛选，得到多株重组酵母菌株。在以甲醇为唯一碳源的培养基上培养，对重组酵母菌株进行了诱导表达。