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在哺乳动物体细胞核移植研究中，克隆胚胎的构建主要有两种方法：电融合法和直接注射法。传统的电融合法虽然操作简便，重复性强，但是因为其融合率相对较低，仪器设备昂贵，操作时间长等缺陷而限制了它的大范围推广。相对于电融合法而言，胞质内直接注射法对卵母细胞和供体核的操作快速有效，减轻了对受体和供体的损伤，同时将供体细胞质对重构胚发育的影响降低到最低程度。已知获得克隆后代的供体细胞类型中，卵丘细胞和颗粒细胞的核移植效率比较理想。本文以这两种体细胞为供体对全细胞直接注射法克隆的一些因素进行研究。
本研究主要研究结果如下：
试验1．在两种不同去核方法的比较实验中，将改良的Willadesn去核法（点压法）与盲吸去核法的去核效率进行了比较。虽然两种去核方法的去核效率(65.57％和68．．8%，P＞0.05)没有显著差异，但是点压法操作简便，去核时间短。
试验2．为了确定最佳的牛重构胚激活方法，将体外成熟的牛卵母细胞经511mol/L Ionophore、CH、Ionophhore+6-DMAP3种不同的激活方法激活，然后在mSOF内培养，24h后各组之间卵裂率没有显著差异（49.27%、48.02%和53.59%，P＜0.05）：培养7d后，孤雌激活卵母细胞在Ionophore+6-DMAP组的囊胚率显著高于Ionophore组和CH组(46.31%、26.55%和27.75%)，Ionophore组和CH组的囊胚率之间没有显著差异(P＞0.05)。
试验3.在确定供体细胞类型对核移植影响的实验中，以新鲜卵丘细胞、原代卵丘细胞和第3代颗粒细胞为供体进行核移植。实验结果显示新鲜卵丘细胞组、原代卵丘细胞组和第3代颗粒细胞组的卵裂率之间没有显著差异(38.18%、41.35%和39.86%，P＞0.05)。新鲜卵丘细胞组、原代卵丘细胞组和第3代颗粒细胞组的囊胚率Ⅰ之间没有显著差异(38.10%、39.62%和40.35%，P＞0.05)。新鲜卵丘细胞组、原代卵丘细胞组和第3代颗粒细胞组的囊胚率Ⅱ之间没有显著差异(15.46%、16.41%和16.08%，P＞0.05)。
试验4．在研究不同处理供体细胞的试验中，以血清饥饿3天的原代卵丘细胞、汇合3d的原代卵丘细胞和汇合4d的原代卵丘细胞为供体进行核移植。研究结果显示各组之间的卵裂率(分别为：41.97%、41.35%和39.69%)和囊胚率Ⅰ(31.15%、32.83%和34.61%)以及囊胚率Ⅱ(12.93%、13.58%和13.74)之间都没有显著差异(P＞0.05)。表明完全融合的细胞经适当体外培养后可以获得较高的囊胚率，血清饥饿对牛重构胚的发育不是必需的。
试验5．在研究注核与激活间时间间隔对重构胚发育影响的研究中，采用了注核后立即激活，注核3h后激活和注核4h后激活3种不同的激活策略对牛重构胚进行激活，然后转移到mSOF中进行培养7d并统计卵裂率和囊胚率。实验结果表明培养24h后立即激活组的卵裂率(27.83%)显著低于注核3h后激活组和注核4h后激活组的卵裂率(33.93%和35.46%，P＜0.05)，培养7d后立即激活组的囊胚率(31.25%)显著低于注核3h后激活组和注核4h后激活组(36.84%和38.00%，P＜0.05)；Ⅱ组和Ⅲ组之间的卵裂率和囊胚率之间都没有显著差别。实验结果说明延迟激活有利于重构胚的发育，可以提高克隆效率。
试验6．为了研究不同培养液对牛重构胚发育的影响，本研究采用了CR1aa、mSOF和mSOF+FBS3种培养液对牛重构胚进行体外培养。3个培养体系都采用卵丘细胞共培养。实验结果表明，研究结果显示mSOF组(39.52%)和mSOF+FBS组的卵裂率(40.96%)显著高于CR1aa组的卵裂率(33.17%)，mSOF+FBS组和mSOF组之间卵裂率没有显著差异(P＞0.05)。mSOF+FBS组的囊胚率Ⅰ(36.76%)和mSOF组的囊胚率Ⅰ(36.36%)也显著高于CR1aa组的囊胚率Ⅰ(31.34%，P＜0.05)。mSOF+FBS组的囊胚率11(36.76%)和mSOF组的囊胚率11(36.36%)也显著高于CR1aa组的囊胚率Ⅱ(31.34%，P＜0.05)。实验结果说明培养液类型对重构胚的发育有影响，并且血清的添加有利于哺乳动物重构胚胎的发育。
试验7．本研究对胞质内直接注射法克隆各步骤中卵母细胞的存活率进行了分析。通过分析发现在胞质内直接注射克隆中，注核过程对重构胚的构建起到重要作用，理想的内径的注核针可以获得接近50%的重构胚。在牛中，胞质内直接注射法克隆的去核针的内径为20μm。