鱼类淋巴囊肿病（Lymphocystis disease，LCD）是一种由淋巴囊肿病毒（lymphocystis disease virus, LCDV）引起的鱼类病毒病，其典型症状为引起鱼体皮肤和浅表组织的瘤状病变，有时在鳃、肝、脾等组织也发现有瘤状物。该病呈世界性分布，流行广泛，已知可感染42科140种以上的海水、半咸水和淡水的野生、养殖及观赏鱼类。该病的爆发致使鱼体丧失其观赏和商业价值，严重时可造成死亡，给鱼类养殖业造成巨大的经济损失。了解鱼类组织细胞上与LCDV感染相关的受体蛋白，以及病毒上与细胞受体相互作用的黏附蛋白对阐明LCDV感染的机制以及该病的防控具有重要意义。论文应用本实验室制备的抗牙鲆LCDV27.8kDa受体蛋白的单克隆抗体（2G11和3D9）确定了LCDV受体在牙鲆组织中的分布，初步探讨LCDV感染牙鲆过程中病毒吸附的生物学基础；并对淋巴囊肿病毒的黏附蛋白进行了初步鉴定，以期为进一步了解病毒与宿主相互作用的机制提供理论依据。另外对LCDV27.8kDa受体在大菱鲆中的存在进行了初步的检测，为研究LCDV对鱼类的广泛性感染提供理论依据。具体研究结果如下：利用LCDV受体单克隆抗体的间接免疫荧光与免疫组织化学技术，对牙鲆外周血、白细胞、鳃、胃、肠、表皮、肝脏、头肾、体肾、脾、性腺、脑、心脏等组织进行了LCDV受体定位观察，发现在牙鲆外周血白细胞、鳃、表皮、胃、肠、肝脏、脾及头肾中均有较强的阳性信号，表明有LCDV27.8kDa受体的分布，这些部位存在介导LCDV吸附、感染牙鲆组织及在组织间扩散的分子基础，推测LCDV通过与鳃、表皮及消化道上皮的受体结合进入牙鲆体内，通过与外周血白细胞上的受体结合侵染白细胞而进入血液循环，实现病毒在体内的传播，进而感染肝脏、脾脏、头肾等器官。利用LCDV受体单克隆抗体对大菱鲆的鳃、肝、体肾、肠、胃等组织进行免疫印迹实验，发现在大菱鲆的鳃、肝、胃、肠中均有蛋白条带特异性显色，证明在大菱鲆中同样分布有LCDV27.8kDa受体的存在，牙鲆与大菱鲆具有相同的细胞受体，且受体在体内组织器官中的分布具有很大的一致性。通过逆向病毒铺覆蛋白印迹技术（VOPBA）对LCDV的黏附蛋白进行鉴定。逆向VOPBA即将LCDV提纯，进行SDS-PAGE，随后将病毒蛋白转移到PVDF膜上，利用病毒的细胞受体蛋白与薄膜共同孵育，通过化学方法显色，显示出能与受体蛋白特异性结合的病毒蛋白条带。实验最终得到一条能与牙鲆LCDV27.8kDa受体蛋白特异性结合的32kDa蛋白条带，对该蛋白进行切胶回收后进行蛋白一级质谱测序，经与基因库进行数据对比，确定该蛋白为LCDV038开放阅读框基因所编码。