【摘 要】
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目的:探讨重复经颅磁刺激对大鼠脑缺血再灌注损伤及NLRP3/Caspase-1/IL-1β炎症通路的影响。方法:将48只3月龄雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、经颅磁组各16只。采用改良的Longa线栓法对模型组、经颅磁组大鼠进行左侧大脑中动脉栓塞1.5 h/再灌注6 h。假手术组仅游离左侧颈动脉,不插入线栓。在术后6 h、第2天至第7天,对经颅磁组大鼠进行10 Hz高频重复经颅磁刺激,每天1
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目的:探讨重复经颅磁刺激对大鼠脑缺血再灌注损伤及NLRP3/Caspase-1/IL-1β炎症通路的影响。方法:将48只3月龄雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、经颅磁组各16只。采用改良的Longa线栓法对模型组、经颅磁组大鼠进行左侧大脑中动脉栓塞1.5 h/再灌注6 h。假手术组仅游离左侧颈动脉,不插入线栓。在术后6 h、第2天至第7天,对经颅磁组大鼠进行10 Hz高频重复经颅磁刺激,每天1次,每次10分钟,连续7天。造模后第7天,使用Longa神经功能评分对大鼠进行神经功能损伤程度评定;TTC染色测定脑梗体积;HE染色观察大鼠左侧大脑皮层区组织病理形态改变;ELISA检测大鼠脑脊液TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-18水平;RT-PCR和Western blot分别检测大鼠左侧皮层区的NLRP3、Caspase-1、IL-1β的m RNA以及蛋白表达水平。结果:1.Longa神经功能评分法:模型组Longa神经功能评分明显高于假手术组,差异具有统计学意义(P<0.001),经颅磁组Longa神经功能评分明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.001)。2.TTC染色:与假手术组相比,模型组大鼠脑组织梗死体积明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,经颅磁组大鼠脑组织梗死体积有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。3.HE染色:在假手术组中,大鼠大脑皮层神经元排列较整齐,胞浆丰富且淡染,胞核居中,核仁清楚。模型组中,大鼠大脑皮层神经元排列不整齐、稀疏,部分神经细胞消失,胞核呈不同程度的固缩,结构模糊不清。相比较于模型组,经颅磁组大鼠大脑皮层神经元变性、神经细胞数量丢失程度均有所减轻。4.ELISA检测:相较于假手术组,模型组大鼠脑脊液炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-18水平明显增高,差异具有统计学意义(P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.001)。相较于模型组,经颅磁组大鼠脑脊液炎症因子TNF-α、IL-6、IL-18水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.001,P<0.001,P<0.001),IL-1β水平有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。5.RT-PCR检测:相较于假手术组,模型组大鼠大脑皮层NLRP3、Caspase-1、IL-1βm RNA的水平明显增高,差异具有统计学意义(P<0.001,P<0.001,P<0.001)。相较于模型组,经颅磁组大鼠大脑皮层NLRP3、Caspase-1、IL-1βm RNA的水平降低,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.01,P<0.001)。6.Western blot检测:相较于假手术组,模型组大鼠大脑皮层NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白的表达水平增高,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05,P<0.001)。相较于模型组,经颅磁组大鼠大脑皮层NLRP3、Caspase-1蛋白的表达水平有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05,P>0.05);IL-1β蛋白的表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:10Hz高频重复经颅磁刺激可能通过抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β炎症通路,减轻神经炎症反应,从而缓解大鼠脑缺血再灌注损伤。
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