小分子化合物与DNA相互作用的光谱研究

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随着饲料添加剂、兽药、农药等的大量使用,食品安全已日益成为人们关注的焦点,上述物质在食品中的残留可能会对消费者的健康造成危害。这类物质一般分子量低于1000,属于小分子化合物。这些小分子化合物在生物体内可能会与DNA发生直接或间接作用,从而改变DNA结构与构象并引起DNA损伤,从而影响其功能或改变其遗传特性。为此,本论文研究小分子化合物与DNA间的作用方式及作用机理具有现实意义,可为外来物质对DNA的结构与功能的影响、毒性机理研究及不良反应的消除提供基础信息。本论文主要内容包括以下三个部分:(1)在pH7.4的Tris-HCl缓冲体系下,应用紫外-可见光谱法、荧光光谱法、DNA热变性法、盐效应法以及黏度法等研究了硫酸沙丁胺醇(SS)与鲱鱼精DNA(hsDNA)之间的相互作用。紫外-可见光谱法结果表明,SS使hsDNA的最大吸收峰增色且红移,初步排除SS与hsDNA之间存在嵌插作用的可能;DNA热变性法结果表明,SS使hsDNA热变性温度变化不大,说明SS与hsDNA之间可能存在静电或沟槽作用方式;盐效应法、KI荧光猝灭实验及黏度法研究的结果同时表明SS与hsDNA之间存在静电和沟槽作用方式;而且研究发现hsDNA的存在使SS的荧光发生静态猝灭,并测得两者之间结合常数K=1.51×104L·mol-1、结合位点数n=1.27。(2)在pH7.4的Tris-HCl缓冲体系下,应用紫外-可见光谱法、荧光光谱法、盐效应法、黏度法以及DNA活性实验等研究了硫酸特布他林(TS)与hsDNA之间的相互作用。紫外-可见光谱法结果表明,TS使hsDNA的最大吸收峰增色且红移,初步排除TS与hsDNA之间存在嵌插作用的可能;DNA活性实验和KI荧光猝灭实验结果同时表明TS与hsDNA之间不可能存在单一的嵌插作用或是沟槽作用,有可能存在静电作用或是静电作用与沟槽作用同时存在;盐效应法及黏度法研究的结果同时表明TS与hsDNA之间存在静电和沟槽作用方式;而且研究发现hsDNA的存在使TS的荧光发生静态猝灭,并测得结合常数为2.95×103L·mol-1,结合位点数为0.92。(3)以亚甲基蓝(MB)作为荧光探针,应用紫外-可见光谱法、荧光光谱法、DNA热变性法、黏度法以及DNA活性实验等研究了草铵膦(GA)与hsDNA之间的相互作用方式及作用机理。紫外-可见光谱法、DNA热变性法及黏度法结果同时表明GA与hsDNA之间可能发生了嵌插作用;DNA活性实验结果表明GA与hsDNA之间不仅能发生单一的嵌插作用,可能二者间也同时发生了静电或沟槽作用;盐效应法结果表明GA与hsDNA之间存在静电作用;荧光光谱法结果表明猝灭剂GA对MB-hsDNA的荧光猝灭不是单纯的动态或静态猝灭,而是两种猝灭形式混合存在。两者之间结合常数K=2.12×105L·mol-1,最大结合数n=2.9。由实验结论可知,不同小分子化合物与DNA间的作用方式不尽相同。根据两者间的作用机理,可通过不同的方法来消减这些作用的存在,从而使人体更健康长寿。
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