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MCL（Manila clam Lectins）是菲律宾蛤仔（Ruditapes philippinarum）免疫系统中重要的体液因子之一,对多种微生物的生长有抑制作用,当菲律宾蛤仔受到外界微生物感染时其在蛤仔体内的表达量会大幅增加。本研究使用S.putrefaciens（Shewanella putrefaciens）感染菲律宾蛤仔,刺激其机体产生MCL,随后对MCL的生物活性、抑菌活性、抑菌机理和保鲜效果进行探究,旨在为MCL的后续研究和应用提供基础数据。其主要内容和结果如下:1通过测定不同月份菲律宾蛤仔血淋巴的血凝活性,探究菲律宾蛤血淋巴中MCL出现的时间规律;采用注射SPS（Shewanella putrefaciens Suspension,S.putrefaciens菌悬液）、刺伤和SPS浸泡三种不同的处理方法探究刺激MCL产生的最佳诱导源;采用不同的硫酸铵盐析方法优化MCL提取工艺。结果表明,菲律宾蛤仔在正常条件下其血淋巴中MCL含量较少,U型96孔板法不能检测到血淋巴中的血凝活性;向菲律宾蛤仔体内注射SPS可以刺激菲律宾蛤仔分泌凝集素,其刺激效果要优于刺伤、SPS浸泡两种方式。当SPS在600nm波长下光密度值达到0.5时,是刺激菲律宾蛤仔分泌MCL的最佳浓度。加入硫酸铵使MCL盐析的过程中,应保持联合液pH值的稳定,否则会使MCL不可逆变性。2采用肉汤稀释法测定MCL对S.putrefaciens的MIC值;采用分光光度法测定MCL对S.putrefaciens生长曲线的影响;通过测定培养液中AKP酶活性和OD260来检测MCL对S.putrefaciens细胞壁、膜完整性的影响;通过扫描电镜观察S.putrefaciens超微结构。结果表明,MCL在0.02412.5 mg/mL的浓度范围内检测不出其对S.putrefaciens的MIC值。0.000241 mg/mL的MCL能显著延缓S.putrefaciens对数生长期的到来。当S.putrefaciens处于对数生长期时,MCL对S.putrefaciens生长的抑制程度与MCL的浓度呈现负相关关系;当S.putrefaciens处于稳定生长期时,MCL对其生长的抑制作用与MCL的浓度呈正相关关系。MCL能破坏菌体的细胞壁和细胞膜,高浓度MCL与S.putrefaciens菌体共培养后能凝集菌体并在菌体周围形成一层膜包裹菌体。3利用非标记定量蛋白质组学方法分析S.putrefaciens细胞在MCL作用6 h后的样品（L组）与正常S.putrefaciens（C组）蛋白表达谱的差异。共鉴定出421个蛋白,其中有74个差异蛋白,16个蛋白表达量上调,58个蛋白表达量下调。蛋白质组学的分析表明,参与氨基酸生物合成途径的磷酸核酶焦磷酸激酶、烯醇化酶（AC:A1S4D7）的表达量上调,其余10种蛋白表达量下调;参与丙酮酸代谢途径、柠檬酸/三羧酸循环途径、氨基酰-tRNA生物合成途径、碳代谢途径的蛋白表达量均下调。这说明,MCL可能是通过阻碍S.putrefaciens体内氨基酸合成,抑制丙酮酸代谢途径、柠檬酸循环途径等进行抑菌的。4以菌落总数、TVB-N值、K值、丙二醛值、pH值作为鲜度指标,以新鲜鲶鱼为实验对象,探究MCL的保鲜效果。结果表明,MCL能降低鲶鱼在保鲜过程中菌落总数、TVB-N值、K值和丙二醛值,对鲶鱼体pH值的变化无明显影响。这说明MCL对鱼类的保鲜有一定的作用。