大肠埃希菌(E.coli)是引起尿路感染、呼吸道感染、伤口感染甚至全身感染的常见病原菌之一，它对三代头孢菌素耐药的主要原因是产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶。ESBLs来自突变的广谱β-内酰胺酶(如TEM-1，TEM-2，SHV-1)，由质粒携带能够水解氨氧头孢菌素和单环β-内酰胺类药物，可被克拉维酸(CA)抑制，最常见于E.coli和克雷伯菌属，也见于其他肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍德菌等细菌。AmpC酶有染色体介导和质粒介导两种基因携带状态，质粒介导的基因来源于染色体。AmpC酶能够水解氨氧头孢菌素、头霉菌素和单环β-内酰胺类药物，可被邻氯西林(CLO)抑制，不能被CA等其他β-内酰胺酶抑制剂抑制。染色体编码的ampC基因存在于大多数革兰阴性杆菌的染色体上(克雷伯菌属和奇异变形杆菌缺乏，沙门菌属尚不确定)，呈诱导表达；质粒编码的ampC基因多为非诱导表达。 E.coli染色体上携带ampC基因，但其操纵子与其他细菌染色体的ampC操纵子不同，因缺少调控基因ampR，呈低水平表达状态，酶产量非常低，临床意义不大。质粒型ampC基因转入或染色体上ampC基因启动或衰减序列突变，ampC结构基因突变或扩增，以及ampC调节基因的突变均能导致AmpC酶的高表达。质粒型AmpC酶和染色体突变型AmpC酶的出现不仅使E.coli的耐药性增强而且直接干扰了临床微生物实验室对ESBLs的检测，增加了临床治疗的难度。 本课题收集南京军区南京总医院临床微生物实验室2001年1月至2004年10月临床各类标本中分离的可疑同时产AmpC酶和ESBLs或单产AmpC酶的40株E.coli，采用一系列的方法对耐药表型、高活性β-内酰胺酶的类型和特点、ampC基因携带和突变表达方式、以及细菌外膜蛋白的改变进行研究，并探讨提高ESBLs检出率和区别AmpC酶的、适用于常规实验室的检测方法。 在抗菌药物敏感试验中，40株菌均呈多重耐药，对头孢三嗪(CRO)、头孢噻肟(CTX)和头孢他啶(CAZ)3种三代头孢菌素中的2种以上出现耐药，对环丙沙