目的:血管性痴呆是脑组织因血管梗塞或狭窄等因素产生衰退,进而损伤记忆功能的一类疾病,老年人为该病的主要发病人群,其重要症状是记忆功能的障碍,此症状从起病之初将一直伴随整个病程。经学者们研究发现,如能在VD早期给予干预,则能有效挽救患者生命。状元丸出自《赤水玄珠》,由明代医家孙一奎所创,组成药物为石菖蒲、远志、茯神、巴戟天、人参、地骨皮。本课题拟探讨状元丸对VD模型大鼠记忆功能的影响及机制,将状元丸水煎液作用于改良两血管阻断法制备的VD模型大鼠,通过Morris水迷宫对大鼠记忆能力和空间探索能力进行检测。镜下观察大鼠白质损伤程度,免疫印迹法检测大鼠脑白质处基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、精氨酸酶1(ARG1)、小胶质细胞表型标记物(CD68)的表达变化,分析状元丸对两血管阻断法制备的VD模型大鼠记忆能力的影响及作用机制。方法:本实验选用7周龄SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为空白组、模型组、对照组、治疗组,每组12只,适应性喂养1周后进行手术造模,术后对照组给与吡拉西坦水溶液、治疗组给与状元丸水煎液、按体表面积法换算用药量,空白组及模型组给予等量生理盐水。连续给药6w后,进行Morris水迷宫实验分析大鼠的记忆能力。实验结束后随机从各组抽取5只大鼠固定取脑以制备石蜡切片,切片采用HE染色和神经髓鞘固蓝染色,镜下观察各组大鼠脑白质损伤程度。各组剩余大鼠取脑分离胼胝体,采用免疫印迹法检测MMP9、MMP2、ARG1、CD86的表达。用Alpha Ease FC和EXCEL软件进行数据处理,所有数据使用(mean±SD)表示,P<0.05则认为差异有统计学意义,P<0.01表示差异显著。结果:(1)Morris水迷宫实验在五天的定向航行实验中发现,模型组所需潜伏期最长,治疗组大鼠与模型组相比,找到平台时间明显缩短(P<0.01),与空白组接近(P>0.05)。对照组大鼠学习能力虽有改善,但与治疗组相比改善不明显。空间探索实验中,模型组相比空白组头部穿越原平台位置次数减少(P<0.05)、原平台位置逗留时间缩短(P<0.01)。经药物干预后,治疗组较模型组穿越次数增加(P<0.05),逗留时间(P<0.01)显著增加,对照组变化不明显。(2)脑组织形态学观察经HE染色后发现,空白组白质区细胞形态完整,细胞核清晰,而造模后的三组大鼠均有不同程度的白质损伤,镜下观察发现模型组损伤最为严重,白质区细胞形态不完整,组织间可见大量空泡,而治疗组相较模型组空泡结构明显减少,细胞形态较完整。对照组相较模型组无明显差别。神经髓鞘固蓝染色后观察发现,空白组胼胝体纤维排列整齐,神经髓鞘着色深且清晰;模型组则出现纤维排列混乱,神经髓鞘着色浅。治疗组神经纤维较模型组排列整齐,髓鞘着色更深。(3)脑组织白质区明胶酶的表达情况:模型组相较空白组MMP2的表达量显著增加,与模型组相比,治疗组MMP2表达均显著下降。对比空白组,模型组、治疗组、对照组MMP9表达量均增多,然而三组间MMP9的表达量并无明显差异,考虑MMP9虽参与VD白质的病理损伤,但状元丸对其无明显影响,其中机制仍需进一步深入研究。(4)小胶质细胞极化因子的表达情况:经改良2-VO法造模6周后,模型大鼠白质区域ARG1表达显著增高。治疗组相比模型组,ARG1的表达明显下降。对照组ARG1表达亦有下降,但与治疗组仍有较大差距。此外,M2型极化因子CD86仅治疗组表达明显上调。结论:状元丸水煎液可以有效治疗改良2-VO法制备的VD模型大鼠的认知能力和空间探索能力;可修复脑组织因缺血缺氧造成的白质损伤,改善神经髓鞘脱失情况;降低白质处MMP2的表达;降低白质处炎性因子ARG1的表达,使CD86表达量增多,诱导小胶质细胞向M2型活化。状元丸对VD模型大鼠记忆功能障碍具有比较明显的改善作用。