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人NDRG2基因(N-myc downstream-regulated gene 2)是本课题组于2000年用消减杂交法从正常成人全脑cDNA文库中发现和获得的新序列。其全长为2,024 bp。NDRG2基因含有16个外显子和15个内含子,定位于染色体14q11.2,编码一个含有357个氨基酸残基、分子量约为40 kDa的蛋白质。已报道该家族共有四个成员:NDRG1、NDRG2、NDRG3和NDRG4,其中NDRG4又分为三个亚型:NDRG4-B、NDRG4-Bvar和NDRG4-H。该家族各成员间的氨基酸残基序列同源性很高,但在各组织间的表达水平有明显差异。目前,人NDRG2的具体功能还不是很清楚,本课题组初步研究结果显示,该基因在多种正常组织中高表达,而在某些肿瘤组织和肿瘤细胞系中低表达或无表达;NDRG2可诱导树突状细胞的分化,这些结果提示:NDRG2基因与肿瘤细胞分化、增殖密切相关。为了深入研究NDRG2基因的功能,阐明其在体内的作用机制,弄清具体的信号传导通路及其如何与其它分子相互作用。本实验分两个部分,第一部分,我们首先运用Real time RT-PCR和Western-blot法,检测丁酸钠诱导结肠癌细胞分化后NDRG2的差异表达情况。结果发现随着诱导时间的延长,NDRG2 mRNA和蛋白水平逐渐升高,提示NDRG2与结肠癌细胞的分化密切相关,但是其机制还不是很清楚,需要进一步研究。第二部分,用腺病毒介导NGRG2(Ad-NDRG2)转染低表达NDRG2的人结肠癌细胞HT-29 ,western blot及RT-PCR方法检测外源性NDRG2基因的表达,借助MTT、流式细胞仪检测对NDRG2转染前后人结肠癌细胞HT-29的生物学行为进行检测。结果发现NDRG2过表达后,明显抑制结肠癌细胞的生长,提示NDRG2具有抑制肿瘤生长的功能。结论:1.结肠癌细胞系经丁酸钠诱导分化后NDRG2的表达随着分化进程升高,说明NDRG2与结肠癌细胞的分化密切相关。2. Ad-NDRG2转染HT29 72h后可明显抑制HT29细胞的增殖速度,并出现了G1期阻滞,说明NDRG2过表达可以抑制结肠癌细胞的生长。