牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus,IBRV)又称牛疱疹病毒I型(Bovine herpesvirus type 1,BHV-1),它会引起一种急性、热性、接触性传染病,在感染牛之后,主要表现出高热、呼吸困难、鼻炎、窦炎和上呼吸道炎症,称为牛传染性鼻气管炎(Infectious Bovine Rhinotracheitis,IBR),又称“红鼻病”或“坏死性鼻炎”[1]。世界动物卫生组织(World Organisation for Animal Health,OIE)将IBR列为法定报告动物疫病。gD蛋白是IBRV的主要结构蛋白,它可以同时诱导体液免疫和细胞免疫,gD也是病毒复制的必需基因,在病毒吸附和侵入宿主细胞过程中起重要作用,gD还是刺激机体产生中和抗体的主要糖蛋白。因此,在IBR的所有蛋白中gD被作为IBRV特异性抗原研究的首选。本研究以本实验室于2017年从呼市周边牧场分离到的IBRV为基础,对其进行鉴定,并命名为IBRVNMHS-1。并以IBRVNMHS-1基因组为模板,设计引物特异性扩增gD基因,与表达载体pET32(+)相连,成功构建重组载体,优化诱导条件,使重组蛋白可溶性表达。以分离到的IBRV NMHS-1毒株为攻击毒,成功感染家兔建立了动物模型。将纯化后的重组蛋白制备成疫苗,并对家兔进行动物免疫试验。试验表明,家兔经过2次免疫后,成功抵制了病毒的感染。通过Western Blot,证明重组蛋白有良好的反应原性;通过动物免疫,间接ELISA方法检测兔血清抗体效价,证明重组蛋白有良好的免疫原性。综上所述,本研究成功分离到一株IBRV,并将其命名为IBRVNMHS-1株;成功诱导gD基因表达,获得了可溶性的目的蛋白;IBRV NMHS-1成功感染家兔建立了动物模型;制备的亚单位疫苗可有效保护实验动物免受强毒攻击,为IBRV的亚单位疫苗的研制提供了可能。