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[目的] 蓖麻毒素属于核糖体失活蛋白(ribosome inactivating proteins,RIPs),由A链(ricin A chain,RTA)和B链组成,其中RTA是活性链,B链为运载体。A链由263个氨基酸组成,分子量32000,具有N-糖苷酶活性,能催化28S rRNA在4234位脱去一个腺嘌呤,使核糖体60S亚基失活,从而抑制细胞内的蛋白质合成,最终导致细胞死亡。近年来蓖麻毒素及其A链已被用作肿瘤导向药物——免疫毒素,用于肿瘤和爱滋病的临床治疗,但有关毒蛋白进入细胞的途径目前仍不甚清楚。 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚虫等腔肠动物体内的生物发光蛋白。1974年由Morise等从发绿色荧光的水母中提纯出来。当受到紫外或蓝光激发时,GFP能发射绿色荧光,且荧光性质稳定,无种属限制。1994年Chalfie等首次在大肠杆菌中表达了能发射绿色荧光的GFP,此后绿色荧光蛋白基因作为一种新的报告基因受到了人们的极大关注。GFP是含238个氨基酸的多肽链,N端和C端都能忍受蛋白的融合,且不影响目的蛋白的结构与功能,因而GFP是目前广泛应用的一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白定位的理想标记。增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)比野生型GFP具有更强的荧光强度,也更为敏感和