病毒感染所引起的呼吸道疾病已经成为世界性的常见疾病之一。人博卡病毒(HBoV)作为引起呼吸道感染的常见病毒之一,虽然发现相对较晚,但受到科研工作者的广泛关注。而有效的诊断和治疗需要具有高效价的抗体,才能建立系统的方法,单克隆抗体是病原检测和诊断的主要工具。目前,有关HBoV单克隆抗体制备的研究很少,因此,HBoV单克隆抗体的制备对于HBoV的诊断和所引起的疾病的治疗有重要意义。本研究利用强大的原核表达载体pET-30a构建重组质粒,通过大肠杆菌表达系统表达重组VP2蛋白,通过柱上变复性纯化目的蛋白。利用血清检查抗原。以纯化蛋白作为抗原,免疫小鼠,利用杂交瘤技术及间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,小鼠体内诱导产生单克隆抗体,并对单克隆抗体进行鉴定。结果表明,构建出HBoVVP2基因的重组质粒,表达并纯化得到了重组HBoVVP2蛋白,利用呼吸道感染患者血清检测抗原,阳性率为77.7%,与国内外检出率基本一致,说明抗原较好。利用杂交瘤技术筛选得到了稳定细胞株,该细胞株可以分泌单克隆抗体。利用该株细胞在小鼠腹部诱导产生具有单克隆抗体的腹水,根据检测和鉴定,所产生的单克隆抗体为IgG抗体,具有较好抗原抗体结合能力,效价达到1：4×105。本实验得到的单克隆抗体,有益于对HBoV的深入研究。该研究结果对HBoV诊断、治疗和进一步研究奠定基础。