[目 的]癌胚抗原相关粘附分子1（CEACAM1）表达于血小板膜上,起负性调节血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ（GPVI）的作用。CEACAM1胞内段的免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIMs）可以抑制GPVI-FcRγ链复合物中FcRγ胞内段的免疫受体酪氨酸激活基序（ITAMs）介导的血小板活化信号转导,但迄今对CEACAM1胞外段结构域在血小板功能调控中的作用仍知之甚少。前期研究提示:胶原刺激血小板释放的基质金属蛋白酶-12（MMP-12）可以酶切血小板膜蛋白CEACAM1胞外段结构域,CEACAM1被酶切后其抑制功能可能受损,导致胶原活化血小板的效应增强。但CEACAM1胞外段的可溶性酶切片段对血小板功能的影响尚不明确,其作用机制也有待进一步探讨。为此,我们研究了CEACAM1胞外段结构域及可溶性酶切片段对血小板功能的影响,并且对相关的机制进行了探索。本研究为阐明CEACAM1负性调节血小板活化的机制、研发新型抗血小板药物提供新的思路。[方 法]第一部分:本部分旨在探索CEACAM1胞外段结构域以及可溶性酶切片段对血小板功能的影响。采用血小板聚集仪观察了表达纯化的人CEACAM1胞外段结构域蛋白（rhCEACAM1s）及人工合成的酶切多肽片段对多种血小板激活剂（花生四烯酸,胶原,凝血酶和ADP）诱导的血小板聚集的影响。采用显微镜观察了 rhCEACAM1s以及多肽对血小板静态粘附于胶原包被的基质的影响。采用Pull down方法探索了多肽作用的血小板靶点蛋白。第二部分:本部分旨在研究多肽对血小板功能影响的机制。首先,我们研究了多肽对胶原受体GPVI介导的血小板活化的影响。采用血小板聚集仪观察了多肽对胶原受体GPVI特异性激活剂convulxin诱导的血小板聚集的影响。采用血小板聚集仪、流式细胞术检测多肽对convulxin诱导血小板ATP、致密颗粒释放的影响;采用蛋白质免疫印迹法研究了多肽对血小板内信号转导通路蛋白磷酸化的影响。其次,我们研究了多肽对血小板整合素受体αⅡbβ3介导的血小板“inside-out”及“outside-in”活化的影响。采用荧光共振能量转移和流式细胞术,我们研究了多肽对血小板钙离子释放以及血小板αⅡbβ3结合率的影响。采用显微镜观察了多肽对血小板在纤维蛋白原包被的基质上铺展及血块回缩的影响。[结 果]第一部分:①低剂量胶原诱导的血小板聚集可被rhCEACAMs抑制。②胶原诱导的血小板聚集也可被CEACAM1 IgC2结构域源性多肽QDTT以及QLSN明显抑制,QDTT、QLSN也抑制花生四烯酸、凝血酶和ADP诱导的血小板聚集。③QDTT、QLSN抑制血小板静态粘附于胶原。第二部分:①GPVI特异性激活剂convulxin诱导的血小板聚集和颗粒释放可被QDTT、QLSN抑制。②QDTT、QLSN抑制血小板PI3K信号转导。QDTT、QLSN抑制GPVI介导的血小板蛋白整体磷酸化并且抑制ITAMs介导的血小板活化信号分子Src、Syk、PLCγ2以及Akt的磷酸化。③QDTT、QLSN抑制血小板αⅡbβ3介导的血小板“inside-out”活化。④QDTT抑制血小板αⅡbβ3介导的血小板“outside-in”活化。[结 论]GPVI介导的血小板聚集及释放可被CEACAM1源性多肽QDTT、QLSN抑制,其信号通路涉及ITAMs介导的Src、Syk、PLCγ2以及Akt的磷酸化。CEACAM1 源性多肽 QDTT 还可以通过抑制 αⅡbβ3“inside-out”及“outside-in”的活化来抑制血小板的功能。