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目的:我们建立CD基因修饰的NSCs自杀系统来抑制C6胶质瘤细胞实验,以期能为胶质瘤找出一个新的治疗方法。材料与方法1取Wistar胎鼠大脑皮质及皮质下组织,胰酶消化及机械吹打后,用悬浮培养的方法,获得细胞克隆,用有限稀释法,得到来源于同一细胞的亚细胞系克隆,用免疫细胞化学方法,鉴定神经干细胞。2进行CD基因扩增及脂质体介导CD基因转染神经干细胞,G418筛选、双标染色鉴定,获取稳定表达基因工程化神经干细胞。3 CD基因转染的神经干细胞与C6细胞共同培养,分组对照观察转染的神经干细胞对C6细胞的抑制作用。MTT检测,结果统计学处理,所有数值以x±s表示,应用SPSS软件进行方差分析,P<0.05为相差显著,P<0.01时为相差非常显著。结果1在本实验中,我们成功地分离、鉴定了孕14～16天Wistar胎鼠脑皮质及皮质下的NSCs,并在体外培养增殖。2 pCMVCD质粒经脂质体介导成功转染NSCs,G418筛选后形成数个抗性细胞克隆。免疫荧光双标染色结果可见抗性细胞克隆表达NSCs的特异性抗原-nestin,呈绿色荧光,同时表达CD基因,呈红色荧光。3共培养中,NSCs/CD在体外加用5-FC对C6细胞有明显的抑制作用。5-FC浓度为100μg/mL,NSCs/CD与C6细胞于1:1,1:4,1:8的比例,3天后贴壁生长细胞明显减少,于1:16,1:32,1:64的比例,细胞的生长也受不同程度抑制。经MTT检测细胞存活率分别是4.8%,5.2%,5.7%,18%,42%,84%。结论:CD基因转染神经干细胞抑制C6细胞增殖产生的旁观者效应是非常有效的,归功于神经干细胞的迁移能力,迁移到胶质瘤细胞周围,将细胞毒素导入胶质瘤细胞,至其死亡,这些细胞是很好的工具来转发细胞毒素到胶质瘤细胞,进一步的研究是非常有价值。