论文部分内容阅读
目的比较细胞学检查、基于分支DNA(b-DNA)信号放大的基因表达定量检测技术及半定量RT-PCR(SqRT-PCR)方法在大肠癌腹腔脱落癌细胞(ECC)检测中的应用,并探讨大肠癌患者术中腹水或腹腔冲洗液(腹腔液)CEA、GCC和CD44v6 mRNA的表达情况及临床意义,旨在为临床上预测大肠癌腹腔微转移寻找更加特异、敏感的检测方法和指标。方法术中收集48例大肠癌患者和12例大肠良性病变病人的腹水或腹腔冲洗液,分别采用基于b-DNA信号放大的基因表达定量检测技术和SqRT-PCR方法检测腹腔液中游离癌细胞CEA mRNA的表达,同时行腹腔冲洗液细胞学检查(PLC),以筛选出对检测大肠癌ECC较敏感的方法,进而用该法测定腹腔液中脱落癌细胞CEA、GCC和CD44v6 mRNA的表达,并结合临床相关资料分析CEA、GCC和CD44v6 mRNA表达的临床意义。结果b-DNA技术和SqRT-PCR方法检测大肠癌患者腹腔ECC的阳性率【43.8%(21/48),31.3%(15/48)】均高于PLC法【4.2%(2/48)】,两者差异显著(P﹤0.01);大肠癌组腹腔液CEA、GCC、CD44v6的表达阳性率分别为43.8%(21/48)、60.4%(29/48)、31.3%(15/48),总阳性率为72.9%(35/48),明显高于腹腔液PLC的2%(1/48);上述3项指标在人大肠癌细胞株SW480中表达均为阳性,在阴性对照组中有1例CEA mRNA检出阳性,其余均为阴性表达;不同Dukes分期、肿瘤分化程度、浆膜侵犯程度、有否淋巴结转移对CEA、GCC和CD44v6 mRNA的阳性表达率差异有统计学意义(P﹤0.05),不同肿瘤大小、患者年龄和性别差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论b-DNA技术和SqRT-PCR方法检测腹腔ECC各有优缺点,均是预测大肠癌腹腔微转移的有效方法,但b-DNA技术操作更为简单,影响因素少,其相对定量结果更为可靠、精确;GCC、CD44v6与CEA一样可作为检测大肠癌腹腔ECC的指标;检测腹腔液中CEA、GCC和CD44v6 mRNA的表达情况有助于大肠癌腹腔微转移的预测及术后治疗方案的制定。