益生性屎肠球菌HDRsEf1对雏鸡盲肠菌群发育的影响

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本论文将实验室分离得到的具有良好益生特性的屎肠球菌HDRsEfl添加在玉米-豆粕基础日粮中,利用变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE)指纹图谱技术来研究它对肉鸡盲肠菌群发育的影响,利用Real-time PCR技术分析了盲肠中特定菌群数量的变化;同时本论文还对正常肉雏鸡在7到14日龄发育过程中盲肠菌群的具体变化进行了研究,并以禽致病性大肠杆菌078为例,通过对组织载菌量的检测和组织病变的观察,对益生性屎肠球菌HDRsEfl对雏鸡抗禽致病性大肠杆菌的效果进行了初步研究。具体研究结果如下:1益生性屎肠球菌HDRsEfl对雏鸡盲肠菌群发育的影响试验选用1日龄健康白羽肉雏鸡共180只随机分成对照组(玉米-豆粕基础日粮)、益生组(添加300g屎肠球菌菌粉/1000kg)和抗生素组(添加50mg金霉素/kg)。每组3个重复,每个重复20只。分别在7、14、21、28、35、42日龄无菌快速采集盲肠内容物,用RT-PCR检测盲肠中乳酸杆菌和大肠杆菌的数量,用DGGE技术检测盲肠肠道菌群的变化情况。结果显示,益生菌的添加可以显著降低雏鸡21日龄盲肠大肠杆菌的数量(P<0.05),显著增加42日龄盲肠乳酸杆菌的数量(P<0.05)。DGGE结果显示雏鸡盲肠菌群从7日龄到14日龄为一个过渡期,从14日龄到42日龄为-个相对稳定期。益生菌和抗生素的添加未影响肠道菌群的正常发育,但益生菌的添加可以促进肠道菌群在过渡期更有效的完成过渡,在稳定期维持更稳定的状态。2早期肉雏鸡盲肠菌群变化规律的研究试验选用1日龄健康白羽肉雏鸡共60只随机分成3个重复组,每个重复20只。使用玉米-豆粕基础日粮进行饲喂,试验周期为14天,分别在7、9、10、11、13、14日龄时颈静脉放血处死6只试验鸡采集盲肠内容物,用DGGE技术检测盲肠肠道菌群的变化情况。UPGMA聚类分析的结果显示肉鸡盲肠菌群以10日龄为一个临界点,在7到9日龄时为一个不停变化的过程,而在10日龄后开始趋于稳定。DGGE指纹图谱分析显示有5个条带在此过程中未出现变化,16S rRNA序列分析表明与这些条带相对应的细菌种类分别是Ruminococcus lactari, Azomonas agilis, Propionibacterium acnes, Streptococcus oralis和Microbacterium testaceum。10日龄以后出现了一些特异性条带,与之对应的细菌种类主要是Eubacterium limosum, Lactobacillus crispatus, Corynebacterium jeikeium和Brachybacterium sacelli。3屎肠球菌HDRsEfl对雏鸡抗大肠杆菌效果的研究试验选用1日龄健康白羽肉雏鸡共60只随机分成3个试验组(对照组、益生组和抗生素组),每个试验组20只,在雏鸡10日龄口服接种107CFU/mL的大肠杆菌0781mL,在攻毒后72h进行载菌量的检测和组织病变程度的观察。载菌量检测结果显示益生性屎肠球菌HDRsEfl和抗生素的添加能显著降低攻毒后72h肉雏鸡心脏和盲肠中大肠杆菌的数量(P<0.05),同时降低肉雏鸡心脏和血液中大肠杆菌的数量,但差异不显著(P>0.05)。肝脏组织病变观察结果显示三个试验组均出现了一定程度的肝细胞气样病变和小泡性脂肪变性;心脏组织病变观察结果显示对照组中的心外膜增厚和心肌细胞变性的程度均比另外两组更严重。
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