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高效液相色谱法（HPLC）自20世纪60年代崛起，经过数十年的发展，在理论和实践等方面都日趋完善，应用范围已涉及医药、环保、生命科学、石油化工等几乎所有基础和应用研究领域。该法也是分析化学中发展最快、应用最广泛的领域之一。然而，由于样品中被测组分本身性质及其低含量的限制，并非所有化合物都可直接用于液相色谱分析。荧光检测具有很高的灵敏度，利用荧光标记技术使本身不发荧光的化合物（如氨基酸、脂肪胺、脂肪酸等）转化成发射荧光的衍生物，能够实现高灵敏荧光检测。本文重点研究了几种新荧光标记试剂的合成和表征，考察了荧光标记试剂的光谱性质，优化了衍生反应条件、色谱分离条件，并将建立的方法应用于不同实际样品的分析中。具体工作内容如下：第一章：综述了HPLC发展史、分类、色谱仪、应用及优缺点；介绍了荧光原理、影响荧光强度的因素和化学衍生法；分析总结了荧光标记试剂在HPLC中的应用概况。第二章：高灵敏荧光衍生试剂4-（1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-）苯甲酸（PIBA）的设计合成，结构表征。并将该荧光标记试剂应用于脂肪胺的高效液相色谱-质谱分析。通过对衍生化条件和色谱分离条件的优化，建立了脂肪胺的柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法，并将方法应用于腐鱼等实际样品测定中。结果表明，衍生反应条件温和，衍生产率高，该方法的线性范围宽，重现性好，灵敏度高。第三章：设计合成高灵敏荧光衍生试剂4-（1-甲基-1H-菲并[9，10-d]咪唑-2-）苯甲酸（MPIBA），并进行了结构表征。考查了MPIBA的紫外性质及荧光性质。将MPIBA进行柱前衍生并经荧光检测对脂肪胺进行了高效液相色谱（HPLC）分离和在线质谱定性。衍生物的荧光激发和发射波长分别为λex=260nm，λem=446nm。80℃下在四氢呋喃（THF）溶剂中用N-乙基-N’-[（3-二甲氨基）丙基]碳二亚胺盐酸盐（EDC）作催化剂，衍生反应10min后获得稳定的荧光产物。在Eclipse XDB-C8色谱柱（4.6×150mm，5μm）上，采用梯度洗脱对12种游离脂肪胺衍生物进行了优化分离。采用大气压化学电离源（APCI）正离子模式进行在线柱后质谱定性，实现了各种脂肪胺衍生物的快速、准确测定。该方法具有良好的重现性，多数脂肪胺的线性回归系数大于0.9996，检测限在10.5-53.4fmol范围内，对实际样品臭豆腐中脂肪胺的测定结果满意。第四章：1，2-苯并-3，4-二氢咔唑-9-乙基氯甲酸酯（BCEOC）用于氨基酸的高效液相色谱-质谱分析。