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目的研究异丙肾上腺素、对核转录因子kappaB (nuclear factor of kappaB, NF-kappaB)p65和E3连接酶MAFbx活性的影响,探讨各种药物防治肌萎缩的作用及其机制方法选择健康的雄性SD大鼠54只,体重195±5g,随机分为A,B,C,D,E,F,G,H,I 9组,每组6只。A组为对照组(假手术组),B、C、D,E组为去神经组,F、G,H,I为异丙肾上腺素组。大鼠分批用戊巴比妥钠(40mg/kg, ip)麻醉后,用右下肢后部中段切断坐骨神经的方法制作失神经骨骼肌动物模型,正常组仅做假手术(不切断坐骨神经),去神经组及异丙肾上腺素组切断坐骨神经1cm以上,分别于去神经第2d、7d、14d、28d处死大鼠(用脊椎脱臼法),用显微外科技术认真游离失神经腓肠肌,切取的肌肉样本快速置于-80℃冰箱冻存,备用。用RT-PCR法检测MAFbx与NF-KB的mRNA:以GAPDH作为内参照,做半定量检测。取样本组织50mg匀浆后用上海生工抽提试剂进行总RNA抽提,然后用MBI的RT-PCR试剂盒,按样本RNA2μg,20μl体系进行反转录。MAFbx其上游引物：5’cta cga tgt tgc agc caa ga 3’,下游引物：5’Ggc agt cga gaa gtc cag tc:3’,共167bp；P65的上游引物：5’gac cag gaa gtc agc gag tc3’下游引物：5’tcc aga ggg aca get ctt gt3’共176bp.作为内参照的GAPDH的引物由山西医科大学实验中心提供,其上游引物：5’tga acg gga agc tca ctg g 3’,下游引物：5’tcc acc acc ctg ttg ctg ta 3’,共307bp.聚合酶链反应按50μl体系,反应条件为：96℃,2′, 1cycle。96℃,30″; Tm(Myf-5 53℃)/(GAPDH 50℃),30″; 72℃,2′,36 cycle。用免疫印迹法(Westernblot法)测定MAFbx与NF-KB的蛋白质：用β-actin作为内参照,做半定量检测。取样本组织100mg匀浆后用普利莱蛋白提取试剂盒进行总蛋白抽提,煮沸、离心后,加样于垂直电泳槽行SDS-PAGE,电泳约3h,转膜1小时30分钟,封闭室温4小时,孵育一抗(Ab1)4℃过夜,漂洗后孵育二抗(Ab2)4℃约4小时,TBS漂洗后,置于暗室加ECL发光试剂盒反应,一分钟左右立即放在暗箱曝光,60秒左右取出浸入显影剂内,观察至最佳显影后,捞出在清水中洗净,然后置于定影剂中15分钟,取出晾干后用数码相机获取图片。最后用NIH的ImageJ软件获取数据,用SPSS软件进行统计分析。结果去神经骨骼肌萎缩时,腓肠肌MAFbx、NF-KB的mRNA和蛋白质在去神经支配后第2d、7d、14d、28d不同时段表达均为上调。NF-KB药物各组与失神经组同时段比较均下调(除2d组外)P<0.05,而MAFbx表达无统计学意义,P>0.05.结论大鼠失神经骨骼肌萎缩早期,MAFbx、NF-KB的表达在腓肠肌为上调,异丙肾上腺素是通过NF-KB途径来防治失神经早期的骨骼肌萎缩的。