胰腺癌是一种恶性程度极高的人类消化道肿瘤,其5年生存率约为9%。由于早期难以发现,大多数患者确诊时就已进入晚期并发生远处转移。由于手术治疗和放化疗的效果并不明显,胰腺癌患者会产生预后不良甚至死亡。研究表明COX2介导产生的前列腺素E2（PGE2）能够体外促进胰腺癌细胞迁移。而EP4受体作为主要的前列腺素受体,在胰腺癌中高表达。在多种癌症发展过程中,EP4受体活化会促进肿瘤发生转移。但是目前EP4受体在胰腺癌转移中的作用及其机制尚不清楚。本研究发现干扰EP4受体表达能够抑制PGE2诱导的胰腺癌细胞迁移,据此我们提出研发小分子EP4受体拮抗剂治疗胰腺癌转移的想法。前期我们实验室通过钙流实验筛选获得一个新型小分子化合物YJ-4-135,其可特异性靶向EP4受体,在人源EP4受体上的抑制活性(IC50=0.98 n M)优于阳性化合物E7046(IC50=10.64 n M),同时该化合物还能抑制猴、小鼠、大鼠上的EP4受体。因此YJ-4-135是高选择性、高活性的EP4受体拮抗剂。此外,我们通过glosensor、CRE报告基因、β-Arrestin检测及ERK1/2的磷酸化这一系列的评价体系,证实了YJ-4-135不仅能够抑制EP4受体偶联Gαs介导c AMP的积累,还能抑制EP4受体与Arrestin之间的相互作用,进而影响ERK1/2的磷酸化。通过体外划痕和Transwell实验,我们发现YJ-4-135能够浓度梯度依赖地抑制胰腺癌细胞的迁移。我们又进一步构建小鼠胰腺癌肝转移模型进行体内药效评价,发现YJ-4-135（75 mg/kg）不仅能够抑制胰腺癌肝转移,还能减缓小鼠体重减轻的现象。最后我们将YJ-4-135与吉西他滨进行联用,发现其能协同吉西他滨,提高小鼠生存率。通过机制研究,我们发现EP4受体拮抗剂YJ-4-135能够抑制YAP蛋白的表达和TEAD的转录活性,从而抑制Hippo信号通路。进一步探究EP4受体与Hippo信号通路之间的联系,我们发现YJ-4-135不仅能够通过抑制PKA的活性来抑制Hippo信号通路,还能抑制ERK1/2的磷酸化,削弱TEAD的转录活性。此外,YJ-4-135能够回复PGE2引起的YAP下游与迁移相关基因（Vimentin、Snai1和E-cadherin）的变化。由此可知YJ-4-135能够通过EP4受体阻碍Hippo信号通路活化,从而抑制胰腺癌转移。综上所述,本文发现了一个高活性、高选择性的新型EP4受体拮抗剂YJ-4-135,并通过体内外药效验证其能够抑制胰腺癌转移。通过机制探究,我们发现EP4受体通过介导PKA/Arrestin-ERK1/2途径影响Hippo信号通路,揭示了EP4受体在胰腺癌转移中是一个重要的调控蛋白,为胰腺癌转移治疗提供了一个新的靶点。