蜂房哈夫尼LuxI/R基因及AHLs与生物胺形成的关系探究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sclin
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei)是一种从即食海参里分离出的腐败的优势菌,有产生生物胺和信号分子的能力。本研究在不同环境条件下,研究蜂房哈夫尼菌生长期间信号分子及其相关调控基因的差异化表达,分析菌体产生物胺变化规律,探讨调控基因(LuxI/R)、信号分子(AHLs)和生物胺三者之间关系。首先在不同的葡萄糖和pH环境条件下,通过紫外分光光度计测定蜂房哈夫尼菌野生型(wt)和三种突变型菌株(ΔLuxI、ΔLuxR和ΔLuxRI)的生长情况,发现不同葡萄糖浓度下对数期四株菌株的生长速率分别约33%/h、32%/h、31%/h、28%/h,不同pH下生长速率为24%/h、19%/h、20%/h、21%/h。通过比较生长速率发现在此两种环境因素下野生型与突变型菌株的生长并无显著差异。通过液质分析测定,蜂房哈夫尼培养12 h时野生株wt与突变株ΔLuxR主要分泌信号分子C6-HSL。当葡萄糖添加量在3g/L时wt和ΔLuxR的C6-HSL的含量均为最高,分别为14.6和13.9ug/m L。在pH为5时,wt的C6-HSL的浓度为最高为6.1ug/m L,在pH为4时,ΔLuxR的C6-HSL的浓度为最高,为2.4ug/m L。结果表明,在不同的葡萄糖浓度与pH梯度下信号分子C6-HSL的分泌发生变化,环境条件对信号分子分泌有影响。同时测定了蜂房哈夫尼菌野生型(wt)和突变型菌株(ΔLuxI、ΔLuxR和ΔLuxRI)四株菌株在不同葡萄糖浓度和pH下的腐胺和尸胺的含量。研究发现,环境条件对蜂房哈夫尼菌生物胺产量也有影响,在不同pH下,12h时ΔLuxI菌株的腐胺含量最低,而四株菌株的尸胺含量均随着pH的增加而减少。在外源葡萄糖添加量为0时,ΔLuxI中的腐胺含量在四株菌株中为最低,菌株ΔLuxI中腐胺含量最低为595mg/L。由此可推测LuxI/R基因可能会影响腐胺的产量。为进一步明确信号分子、生物胺与调控基因三者之间关联,同时还通过荧光定量PCR检测了与生物胺代谢的相关基因赖氨酸脱羧酶基因(ldc)与鸟氨酸脱羧酶基因(spec)的表达情况。在不同的葡萄糖浓度与pH下,赖氨酸脱羧酶基因(ldc)与鸟氨酸脱羧酶基因(spec)的相对表达情况有所不同。结果表明,相比于其他葡萄糖浓度,四株菌株在外源添加葡萄糖为0g/L时,赖氨酸与鸟氨酸脱羧酶基因的相对表达量均为最低。当四株菌株在不同的pH下培养时,赖氨酸脱羧酶基因在pH为8时相对表达量均为最低为0.43,0.45,0.47,0.46。鸟氨酸脱羧酶基因spec在pH为6时相对表达量为最高为2.49,2.46,2.45,2.48。群体感应相关基因(LuxI/R)会影响脱羧酶基因的表达,其中基因spec更容易受到LuxI/R基因的影响。通过分析野生型与突变型菌株中LuxI/R基因,信号分子与生物胺的相关性,发现,LuxI/R基因更能影响信号分子的分泌。在不同葡萄糖浓度下,C4-HSL对腐胺存在一定的抑制作用,而3-OXO-C8-HSL能在一定程度上的对尸胺有促进作用。在不同的pH下,C4-HSL和3-OXO-C8-HSL对尸胺存在抑制作用。本研究通过在常见的环境因素葡萄糖浓度与pH变化的基础上,研究群体感应相关基因LuxI/R对蜂房哈夫尼菌野生型(wt)与突变型(ΔLuxI、ΔLuxR、ΔLuxRI)生物胺含量、生物胺相关基因表达量、生长情况及信号分子的影响情况。并探究了不同条件下蜂房哈夫尼菌LuxI/R基因及信号分子(AHLs)与生物胺形成的关系,分析了三者之间的内在关联性。为后续蜂房哈夫尼菌的防治以及水产品保鲜技术提供了一定的理论基础,并且开拓了新思路。
其他文献
地理事物和地理现象往往随时间变化作为过程存在,近年来高考对于地理过程知识的考察越来越多,但在实际教学中,中学地理教师往往注重培养学生的空间思维而忽视时间思维的培育,因此基于时间思维培养的地理过程教学策略研究是极其必要的。探究出在地理过程教学中培养时间思维素养的策略和方法,能够有效地填补理论空白,指导中学地理教学实践。本文通过分析高中地理必修和选择性必修四本教材,运用文献研究法、问卷调查法、访谈法,
学位
染料对水污染一直是人们关心的重点问题,目前市面上的一些处理水污染产品的缺点是价格昂贵,而且易出现泥料流失难以处理等造成二次污染。而静电纺丝的存在为吸附领域增添了新的形势,该技术方法简单,操作方便,是目前纤维制备方法之一。通过该方法制成的纤维具有较好的均一性和连续性。目前已有对该技术方法结合无机材料硅藻土制备纤维用于吸附染料,但该项研究尚未成熟,存在纤维易溶于水和对染料吸附性能的探究等问题,因此需要
学位
CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)系统具有效率高,操作简便等优势,目前被广泛应用于原核生物的基因改造中。基于CRISPR/Cas9系统构建的碱基编辑器工具可以实现特定位点的碱基编辑,近年来也得到了广泛应用。本文旨在利用以CRISPR/Cas9系统和基于CRISPR/Cas9系统的碱基编辑器,在
学位
随着新一轮课程改革的推进,教育部编订了《普通高中地理课程标准》(2017版),提出培养学生必备的地理学科核心素养,创新培育核心素养的学习方式,建立基于学科核心素养发展的学习评价体系,倡导自主、合作、探究的学习方式和教学模式。5E教学模式以学生为主体、以探究活动为中心,围绕其在高中地理教学中的应用展开研究具有一定的现实意义。本文通过对文献的检索与分析,梳理出教学模式的内涵和5E教学模式的具体内容,对
学位
红色文化资源是中国共产党带领人民在百余年的伟大实践中创造的宝贵财富,在新时代背景下发挥着重要的教育价值。将红色文化资源融入中小学各学科的教学中,对于丰富学科课程资源、提升学生的学习兴趣、促进学生对于知识的理解和运用、加强思政教育、最终加快推进立德树人教育根本任务的实现具有重要意义。为了进一步发挥红色文化资源的教育价值,推进红色文化资源在中学教学中的应用,本文以烟台市红色文化资源为例,以初中地理教学
学位
我国每年生产土霉素时产生大量的土霉素菌渣,土霉素菌渣中含有丰富的蛋白质和纤维素等有机营养物质。目前,对土霉素菌渣处理主要采用堆放、焚烧或简单的填埋等方法,这些方法不仅没有对菌渣营养物质进行很好地利用,反而对环境带来不小的污染问题。微生物在催化降解有机污染物变废为宝及在污染环境的生物修复方面发挥着极其重要的作用。目前,土霉素菌渣降解菌的相关研究偏少,利用微生物降解土霉素菌渣的应用研究几乎空白。因此筛
学位
随着特高压输变电的发展,对绝缘纸的性能提出严苛的要求,如何提高绝缘纸的性能面临巨大挑战。本课题研究了掺杂不同用量和不同打浆度的再生纤维素纤维对绝缘纸物理性能和电气性能的影响。结果表明,在浆料配比中,当再生纤维素纤维用量为10%时,绝缘纸的交流击穿强度较高,其中油纸击穿强度比纯的针叶木绝缘纸提高17.7%;随着再生纤维素纤维打浆度从15°SR提高到80°SR,绝缘纸的电气性能和抗张强度都呈上升趋势,
期刊
葡萄酒的口感独特,风味佳美并且营养成分丰富且容易被人体吸收利用,是一种深受人们喜欢的饮品。但是氧化和微生物危害是影响葡萄酒质量和风味的主要因素。氧化会导致葡萄酒出现过氧化味,颜色浑浊等问题,从而降低葡萄酒的营养品质[1]。二氧化硫(SO2)作为一种抗氧化剂和抑菌剂,在葡萄酒中作为防腐剂已经被使用了好几个世纪。但是葡萄酒中的二氧化硫主要以亚硫酸盐的形式添加,这可能导致人们产生过敏反应,可能会使人出现
学位
虫草素作为传统药用菌蛹虫草的主要生物活性物质,具有抗癌、抗肿瘤、抗病毒等生理功能。目前,蛹虫草菌液体深层发酵是虫草素的主要生产途径,然而其发酵产量低、周期长等特点,导致虫草素生产强度低,无法满足工业化生产要求。模式真菌酿酒酵母具有遗传背景清晰、繁殖快、生产强度高等优点,其作为底盘细胞广泛应用于多种天然产物的生物合成,异源表达虫草素合成基因构建酿酒酵母工程菌有助于实现虫草素高效生产。基于前期构建的产
学位
导弹天线罩是导弹中的一个较为特殊的舱段,它不仅是导弹弹体中的一部分,又同时在雷达制导系统中起主要作用,保证导弹在飞行过程能够正常运转。近年来,研究最为广泛的天线罩材料多为高性能的石英陶瓷以及纤维增强陶瓷材料,他们的一系列优点如力学强度高、热稳定性好、化学性质稳定以及耐雨蚀、热膨胀系数小等,因此被广泛应用于航空航天领域,但是它们自身也有一定的缺点,如高温易脆化、坯体易开裂、易吸潮等会降低陶瓷材料自身
学位