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目的：研究神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)移植及NSCs与神经生长因子(NGF)联合移植对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆的恢复及脑内神经干细胞的存活、迁移和分化的影响。
方法：①取新生大鼠海马中神经干细胞进行培养，采用免疫荧光细胞化学技术检测培养细胞巢蛋白(Nestin)的表达。胎牛血清诱导神经干细胞分化，行NSE(神经元特异烯醇化酶)、GFAP(胶质纤维酸性蛋白)免疫细胞化学染色，鉴定神经元及星形胶质细胞。
②单侧切断大鼠穹隆海马伞(FF)制备AD模型。
③利用脑立体定位技术分别将神经干细胞及神经干细胞与NGF联合移植于AD大鼠侧脑室内，移植后两周和三周作Y-迷宫实验，检测大鼠的学习能力和记忆能力。移植后四周取脑应用免疫组化及免疫荧光技术检测移植后神经干细胞的存活、迁移和分化。
结果：从新生大鼠海马分离的细胞中成功培养出神经干细胞，且细胞绝大多数表达神经干细胞的标志物神经巢蛋白(Nestin)。胎牛血清的诱导下，我们所分离培养的神经球具有多分化潜能，少部分细胞分化为NSE阳性的神经元细胞，大部分细胞分化为GFAP阳性的星形胶质细胞。
将5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的神经干细胞、神经干细胞与NGF联合移植于AD大鼠的侧脑室内，Y-迷宫测试大鼠的学习、记忆能力：AD组明显下降(P＜0.01)；神经干细胞组(NSCs组)与AD组比较有改善(P＜0.05)神经干细胞与NGF联合移植组(NGF组)大鼠的学习、记忆能力进一步改善，与NSCs组比较有差异(P＜0.05)，而与正常组比较差异无显著性(P＞0.05)。免疫组织化学技术检测显示：NSCs组及NGF组大鼠侧脑室附近区域可见BrdU阳性细胞，并向周围迁移NSE免疫组化染色结果显示，NGF组大鼠脑内皮层及海马区NSE阳性细胞数较NSCs组回升显著(P＜0.01)；用免疫荧光双标方法检测，可发现脑内皮层及海马区部分BrdU阳性细胞分化为NSE阳性细胞，NSCs组及NGF组双阳性细胞总数占细胞总数的百分比分别为(18.49﹪)、(9.80﹪)，NSCs组及NGF组组间有明显差异(P＜0.05)。
结论：神经干细胞与神经生长因子联合移植能更好地促进AD大鼠学习记忆能力的恢复及脑内神经干细胞的存活、迁移和分化。